Bright-Glo™ 萤光素酶（荧光素酶）报告基因检测系统

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哺乳动物细胞中高通量定量萤火虫 (Photinus pyralis) 萤光素酶表达，需要高灵敏度并适应自动化系统连续操作的试剂。 Bright-Glo™ Luciferase Assay System(Bright-Glo™ 萤光素酶检测系统 ) 是专为满足这种需要而设计的均质检测方法，灵敏度高，光信号的半衰期大约为 29 分钟，无需对样品进行预处理。这一点也满足了那些样品少，但是仍要求高灵敏度和操作简单的研究人员的需求。


关键词：萤火虫荧光素酶，萤火虫萤光素酶，Bright-Glo™ 荧光素酶，高灵敏度，操作简单，自动化系统

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产品名称 规格 目录号 目录价 促销价
Bright-Glo™ Luciferase Assay System 10ml E2610 ￥1111 无
Bright-Glo™ Luciferase Assay System 100ml E2620 ￥6973 无
Bright-Glo™ Luciferase Assay System 10 × 100ml E2650 ￥61026 无
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组分列表

  • E2610

    Bright-Glo™ Luciferase Assay System

    组分名称 规格 组分号
    Bright-Glo™ Luciferase Assay Buffer 1 × 10ml E264A
    Bright-Glo™ Luciferase Assay Substrate 1 × 1 vial E263A

  • E2620

    Bright-Glo™ Luciferase Assay System

    组分名称 规格 组分号
    Bright-Glo™ Luciferase Assay Substrate 1 × 1 vial E263B
    Bright-Glo™ Luciferase Assay Buffer 1 × 100ml E264B

  • E2650

    Bright-Glo™ Luciferase Assay System

    组分名称 规格 组分号
    Bright-Glo™ Luciferase Assay Substrate 10 × 1 vial E263B
    Bright-Glo™ Luciferase Assay Buffer 10 × 100ml E264B

储存温度

储存条件：Bright-Glo™ Luciferase Assay Substrate 储存于 -20°C。Bright-Glo™ Luciferase Assay Buffer 低于 25°C储存。（E2650，E2620，E2610）

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  • Q:萤光素酶报告基因检测数据如何归一化？ 双萤光素酶报告基因检测有哪些优势？

    研究者常常使用单萤光素酶报告基因系统来监测遗传调控元件的功能，因为其操作简单而且反应灵敏。但是，单报告基因系统无法区分不同实验组之间信号的变化是来自对报告基因的特异调控，还是细胞整体事件的结果（增殖、凋亡、坏死等），也无法区分不同组之间转染效率和细胞数目差异带来的影响。所以，在分析实验结果之前，一般会通过样品的其他特征先对数据进行校正，尽量减少上述非实验研究变量的干扰，这也就是数据的归一化处理。

     

           常用的归一化方法有：细胞总蛋白，细胞活力，细胞数，及内参报告基因等。对于稳定转染的单报告基因细胞系来说，细胞总蛋白、细胞活力（例如CellTiter-Glo®或CellTiter-Fluor™ Viability Reagent）、细胞数这几个参考指标，可以很好的排除不同组之间由细胞整体事件和细胞数目带来的干扰。对于瞬时转染实验，这几个指标只能排除一部分干扰，转染效率可能引入的显著变异，却无法解决。这种情况下，建议共转染另外一个可以组成型表达的报告基因，来作为内对照，即内参报告基因（双报告基因系统）。内参报告基因的活性与转染的DNA量与细胞整体的蛋白表达能力相关。用内参基因的表达活性来校正待测基因的表达量，可以排除转染效率和细胞整体事件对结果的影响。


          Normalizing Genetic Reporter Assays: Approaches and Considerations For Increasing Consistency And Statistical Significance By Trista Schagat, Ph.D., Aileen Paguio, M.S., 

          And Kevin Kopish, B.S., Promega Corporation

     

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  • Q：Promega提供哪些萤火虫萤光素酶报告基因检测产品，如何选择？

    萤火虫萤光素酶检测系统特点及区别如下表所示：



    • 实验通量大时，建议选择信号更稳定、均质型（Homogenous）的检测系统；
    • 样品中萤光素酶含量低时（难转染细胞模型等），建议选择信号强度高的检测系统；
    • 有自动加样设备时，可以用闪光型（Flash）系统进行较多样品的检测，否则辉光型（Glo）系统操作更简便、结果更稳定；
    • 培养的动物细胞适用于所有检测系统，非动物细胞样品首选非均质型检测方法；
    • 非均质型试剂可以在任何规格的孔板培养细胞；均质型试剂推荐在96/384孔板中培养细胞，或与Glo lysis Buffer（Cat#E2661）配合使用，采取非均质方式检测； 
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