TnT® Quick Coupled Transcription/Translation System
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TNT® Quick Coupled Transcription/Translation System ( TNT® 快速转录 / 翻译偶联系统 ) 可方便地在一个试管内进行偶联的转录 / 翻译反应,适合真核生物无细胞蛋白质表达。TNT® 快速转录 / 翻译偶联系统将 RNA 聚合酶、核苷酸、盐类、氨基酸、重组的 RNasin® 核酸酶抑制剂与网织红细胞裂解物混合在一起,形成了 TNT® 快速混合母液 ( Master Mix )。TNT® 快速转录 / 翻译偶联系统有两种配置,分别对克隆在 T7 或 SP6 RNA 聚合酶启动子下游的基因进行转录和翻译。使用这两种系统时,模板 DNA 的量为 0.2-2.0μg,模板可以是带有 T7 或 SP6 启动子的环状质粒 DNA,也可以是含有 T7 启动子的 PCR 片段,将模板加入到 TNT® 快速混合母液,反应体系为 50μl,30℃ 下孵育 60-90 分钟。表达反应可产生足够量的蛋白,用于包括 GST pull-down 和凝胶阻滞电泳在内的多种实验。
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