TnT® T7 Insect Cell Extract Protein ExpressionSystem
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TNT® T7 Insect Cell Extract Protein Expression System ( TNT® T7 昆虫细胞提取物蛋白表达系统 ) 是用于无细胞蛋白表达的转录 / 翻译偶联系统,方便、快速,仅需使用一个试管即可完成。加入 DNA 模板即可启动蛋白合成反应,无需花费长时间在体外合成 RNA。该提取物由普遍使用的 Sf21( Spodoptera frugiperda Sf21) 细胞系制成。所有转录 / 翻译反应的必要组分均在 TNT® T7 ICE Master Mix 中提供。启动蛋白合成反应仅需加入 DNA 模板。反应体系在 28-30℃ 孵育,4 小时内完成。克隆在 T7 启动子下游的基因可被表达出来。pF25A 和 pF25K ICE T7 Flexi® 载体经过优化,可使本系统得到最佳产率。这些载体在基因编码区域的 5' 和 3' 端含有非翻译区 ( UTR ),用于提高翻译的效率。使用 TNT® T7 昆虫细胞提取物蛋白表达系统及上述载体,可得到 75μg/ml 的功能蛋白。
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