NanoBRET™ PPI Starter Systems
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NanoBRET™ 技术是一种改良的生物发光荧光共振转移技术 ( BRET )，使用最新型的专利报告基因 NanoLuc® 萤光素酶作为 BRET 的能量供体，HaloTag® 标签蛋白标记的 NanoBRET™ 618 荧光配基作为能量受体，用来检测活细胞中蛋白间的相互作用。NanoBRET™ Protein : Protein Interaction ( PPI ) Assays 使用 NanoLuc® 萤光素酶和 HaloTag® 标签蛋白来与目标蛋白构成融合蛋白，使检测更加灵敏，可重复性更高。低水平表达全长的蛋白的方法使 PPI 监测和筛选研究能反映出真实细胞内的生理功能。
NanoBRET™ PPI Starter Systems 包含了用于构建 NanoLuc® 萤光素酶和 HaloTag® 标签融合蛋白的载体、NanoBRET™ PPI Positive Control Pair ( p53, MDM2 ) 、用于产生供体信号的 NanoLuc® 萤光素酶底物和用于作为荧光能量受体的 HaloTag® NanoBRET™ 618 配基。
关键词：活细胞蛋白互作，HaloTag®荧光配基，BRET
Promega公司拥有NanoLuc®萤光素酶(又称NanoLuc®荧光素酶)及底物相关专利。
NanoLuc®萤光素酶专利如下：
专利号：ZL 2010 8 0019477.4；专利公告号：102459579
NanoLuc®萤光素酶底物（Furimazine）的专利如下：
专利号：ZL 2011 8 0063659.6；专利公告号：103443121
专利号：ZL 2011 8 0062485.1；专利公告号：103370319
注意：使用NanoLuc®产品，研究人员需同意接受本有限使用商标许可条款（LULL）的约束，否则视为侵犯专利权。
MCS Starter System：使用传统的多克隆位点 ( MCS ) 方法克隆构建 N 端和 C 端 NanoLuc® 萤光素酶和 HaloTag® 标签融合蛋白。
Flexi® Starter System：使用 Flexi® 载体克隆系统来构建 N 端和 C 端 NanoLuc® 萤光素酶和 HaloTag® 标签融合蛋白，一种基于稀有限制性内切酶 SgfI 和 PmeI 进行定向克隆的方法，能够在 Flexi® 载体间更加快速，高效，高保真地进行蛋白编码区转移，而无需重新测序。也可使用 Find My Gene™ 来查找购买即用的 Flexi® 载体的 ORF 克隆，更加简单的构建融合蛋白。
特点：
• 了解真实生物学状态：活细胞检测技术，使用全长蛋白或蛋白片段，可以实时监测蛋白 : 蛋白相互作用。
• 监测变化：可逆的检测技术，既能研究蛋白相互作用的诱导，也能研究蛋白相互作用的抑制。
• 检测系统性能更佳：光信号更强，蓝移的供体信号和红移的受体光谱产生最佳的光谱叠加，与传统 BRET 方法相比信号更强，背景更低。
• 检测通量可灵活调整：可在 96 孔板和 384 孔板上检测，误差低，重复性好。
• 更加便捷：NanoBRET™ PPI Starter Systems 提供了使用 NanoBRET™ PPI Assay 进行蛋白相互实验设计和优化的所有试剂。
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