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NanoBRET® 细胞内靶标结合检测技术
课程概要
NanoBRET® Target Engagement
技术可用于：
- 细胞内靶标结合的定量分析
- 细胞内化合物的选择性谱分析
- 测量细胞内化合物滞留时间
- 评估细胞内化合物的可用性
讲座主要相关产品
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NanoBRET®TE Intracellular Kinase Assay K-3
NanoBRET® TE Intracellular Kinase Assay 是用于化合物与激酶的靶标占据检测的完整检测系统
该方法是活细胞水平的相互作用检测，使用全长激酶，超过350 种激酶载体可供选择
可进行化合物与靶蛋白滞留时间及亲和力定量检测，每种激酶都有对应的操作指导 (Application Note)
适合高通量筛选需求，兼容 96、384 孔板，多种产品模式提供，可根据自己的需求选择产品
根据靶标不同，有多种 Tracer 类型可供选择；每个检测系统有不同规格可选，10,000 次反应规格系统不包含对照激酶融合载体（positive control fusion vectors）和转染运载体DNA（ transfection carrier DNA）N2600, N2601, N2810 -
NanoBRET®TE Intracellular Kinase Assay K-4
NanoBRET® TE Intracellular Kinase Assay 是用于化合物与激酶的靶标占据检测的完整检测系统
该方法是活细胞水平的相互作用检测，使用全长激酶，超过350 种激酶载体可供选择
可进行化合物与靶蛋白滞留时间及亲和力定量检测，每种激酶都有对应的操作指导 (Application Note)
适合高通量筛选需求，兼容 96、384 孔板，多种产品模式提供，可根据自己的需求选择产品
根据靶标不同，有多种 Tracer 类型可供选择；每个检测系统有不同规格可选，10,000 次反应规格系统不包含对照激酶融合载体（positive control fusion vectors）和转染运载体DNA（ transfection carrier DNA）N2520, N2521, N2540 -
NanoBRET®TE Intracellular Kinase Assay K-5
NanoBRET® TE Intracellular Kinase Assay 是用于化合物与激酶的靶标占据检测的完整检测系统
该方法是活细胞水平的相互作用检测，使用全长激酶，超过350 种激酶载体可供选择
可进行化合物与靶蛋白滞留时间及亲和力定量检测，每种激酶都有对应的操作指导 (Application Note)
适合高通量筛选需求，兼容 96、384 孔板，多种产品模式提供，可根据自己的需求选择产品
根据靶标不同，有多种 Tracer 类型可供选择；每个检测系统有不同规格可选，10,000 次反应规格系统不包含对照激酶融合载体（positive control fusion vectors）和转染运载体DNA（ transfection carrier DNA）N2500, N2501, N2530 -
NanoBRET®TE Intracellular Kinase Assay K-8
NanoBRET® TE Intracellular Kinase Assay 是用于化合物与激酶的靶标占据检测的完整检测系统
该方法是活细胞水平的相互作用检测，使用全长激酶，超过350 种激酶载体可供选择
可进行化合物与靶蛋白滞留时间及亲和力定量检测，每种激酶都有对应的操作指导 (Application Note)
适合高通量筛选需求，兼容 96、384 孔板，多种产品模式提供，可根据自己的需求选择产品
根据靶标不同，有多种 Tracer 类型可供选择；每个检测系统有不同规格可选，10,000 次反应规格系统不包含对照激酶融合载体（positive control fusion vectors）和转染运载体DNA（ transfection carrier DNA）N2620, N2621, N2820 -
NanoBRET®TE Intracellular Kinase Assay K-9
NanoBRET® TE Intracellular Kinase Assay 是用于化合物与激酶的靶标占据检测的完整检测系统
该方法是活细胞水平的相互作用检测，使用全长激酶，超过350 种激酶载体可供选择
可进行化合物与靶蛋白滞留时间及亲和力定量检测，每种激酶都有对应的操作指导 (Application Note)
适合高通量筛选需求，兼容 96、384 孔板，多种产品模式提供，可根据自己的需求选择产品
根据靶标不同，有多种 Tracer 类型可供选择；每个检测系统有不同规格可选，10,000 次反应规格系统不包含对照激酶融合载体（positive control fusion vectors）和转染运载体DNA（ transfection carrier DNA）N2630, N2631, N2830 -
NanoBRET®TE Intracellular Kinase Assay K-10
NanoBRET® TE Intracellular Kinase Assay 是用于化合物与激酶的靶标占据检测的完整检测系统
该方法是活细胞水平的相互作用检测，使用全长激酶，超过350 种激酶载体可供选择
可进行化合物与靶蛋白滞留时间及亲和力定量检测，每种激酶都有对应的操作指导 (Application Note)
适合高通量筛选需求，兼容 96、384 孔板，多种产品模式提供，可根据自己的需求选择产品
根据靶标不同，有多种 Tracer 类型可供选择；每个检测系统有不同规格可选，10,000 次反应规格系统不包含对照激酶融合载体（positive control fusion vectors）和转染运载体DNA（ transfection carrier DNA）N2640, N2641, N2840 -
NanoBRET®TE Intracellular Kinase Assay K-11
NanoBRET® TE Intracellular Kinase Assay 是用于化合物与激酶的靶标占据检测的完整检测系统
该方法是活细胞水平的相互作用检测，使用全长激酶，超过350 种激酶载体可供选择
可进行化合物与靶蛋白滞留时间及亲和力定量检测，每种激酶都有对应的操作指导 (Application Note)
适合高通量筛选需求，兼容 96、384 孔板，多种产品模式提供，可根据自己的需求选择产品
根据靶标不同，有多种 Tracer 类型可供选择；每个检测系统有不同规格可选，10,000 次反应规格系统不包含对照激酶融合载体（positive control fusion vectors）和转染运载体DNA（ transfection carrier DNA）N2650, N2651, N2850 -
NanoBRET®TE Intracellular Kinase Assay K-12
NanoBRET® TE Intracellular Kinase Assay 是用于化合物与激酶的靶标占据检测的完整检测系统
该方法是活细胞水平的相互作用检测，使用全长激酶，超过350 种激酶载体可供选择
可进行化合物与靶蛋白滞留时间及亲和力定量检测，每种激酶都有对应的操作指导 (Application Note)
适合高通量筛选需求，兼容 96、384 孔板，多种产品模式提供，可根据自己的需求选择产品
根据靶标不同，有多种 Tracer 类型可供选择；每个检测系统有不同规格可选，10,000 次反应规格系统不包含对照激酶融合载体（positive control fusion vectors）和转染运载体DNA（ transfection carrier DNA）NF1200, NF1001 -
Cell-Permeable Kinase NanoBRET®TE Tracers
检测化合物对活细胞中激酶靶标的细胞水平的亲和力
NanoBRET® Target Enhancement (TE) Intracellular Kinase Assays的一部分
NanoBRET® TE Tracer产品增加了anoBRET® TE Kinase Assays的灵活性和模块性
与Intracellular TE Nano-Glo® substrate/inhibitor 和NanoLuc®-kinase fusion vectors一起使用N2602, N2492, N2482, N2622, N2632, N2642, N2652, NF1011 -
Tracer Dilution Buffer
NanoBRET® Target Engagement Assays的组分，可单独购买
用于维持NanoBRET® TE Tracers 的溶解性N2191 -
Intracellular TE Nano-Glo® Vivazine®/Inhibitor
用于NanoBRET® Target Engagement (TE) Assays 检测
试剂中 Nano-Glo® Vivazine®底物的量足够在特定时间段内产生 BRET 检测所需的明亮的供体发光信号
Extracellular NanoLuc® inhibitor （细胞外NanoLuc® 抑制剂）是一种不能透过细胞膜的分子，可以用于抑制细胞外环境的任何 NanoLuc® 信号
半衰期更长，适合检测时间超过 2 小时以上的操作方案。Nano-Glo® Substrate适用于做终点法检测或 2 小时以内的动力学检测N2200, N2201 -
CC1 pan-Kinase Inhibitor
用于NanoBRET®Target Engagement Intracellular Kinase Assays的对照化合物
对多种激酶有强烈抑制作用的抑制剂N2661 -
FuGENE® HD Transfection Reagent
更好地转染具有挑战性的细胞系
用于难以转染的细胞系
用于原代细胞的转染
用于蛋白质和病毒生产E2311, E2312 -
GloMax® Discover System
直观的触摸显示屏和预置程序使您方便简单的得到数据和分析结果。
经过优化的，系统中预置 50多个Promega程序，减少您优化仪器设置的时间。
可进行滤光片式化学发光、荧光、紫外-可见光吸光度、生物发光共振能量转移 ( BRET ) 和荧光共振能量转移 ( FRET ) 检测，还可定制滤光片。
6至384孔微孔板的灵活检测模式。
可放置于实验台上或整合进大的自动化平台以实现高通量。
更宽的动态范围使您在同一次试验中检测高值和低值样品，更高的灵敏度适于检测低水平样品，更低的孔间干扰。GM3000 -
NanoBRET®Target Engagement CDK Selectivity Systems
在活细胞中分析化合物对细胞周期蛋白依赖性激酶 (CDK) 的选择性
确定化合物或抑制剂对多达 16 种 CDK 的亲和力和占有率
每个 NanoBRET®Target Engagement (TE) CDK Selectivity Systems 都使用简单的仅需“添加-读取”的微孔板工作流程，并提供一个 CDK 载体组合（A 或 B）和一个 NanoBRET® TE Kinase Assay
两个转染即用型 NanoBRET® TE CDK 载体组（A 和 B），包含 8 对 CDK-NanoLuc®NP5000, NP5100, NP5050, NP5150 -
NanoBRET®Target Engagement (TE) Selectivity DNA Controls
NanoBRET® TE K192 Kinase Selectivity System和NanoBRET® TE CDK Selectivity Systems 的对照载体
这些DNA对照提供转染运载体DNA（Transfection Carrier DNA）和两个转染级别的对照载体NP1000 -
NanoBRET®Target Engagement K192 Kinase Selectivity System
分析活细胞中不同激酶组合的选择性
分析化合物对一组192种人激酶的细胞选择性
优化的是操作方案只需“添加-读取”，可以在单次实验定量192种全长激酶的化合物占有率
K192系统提供可直接转染的激酶载体组试板和简单的NanoBRET®TE Kinase AssayNP4100, NP4101, NP4050, NP4060 -
NanoBRET®Target Engagement HDAC Assays
直接测量 HDAC与测试化合物在活细胞中的亲和力和滞留时间
通过化合物直接竞争性地取代与NanoLuc® -HDAC 融合蛋白可逆结合的 Tracer (示踪剂)的原理进行检测
检测依赖于与原生形式相似的全长蛋白质
低水平表达目标蛋白N2080, N2081, N2170, N2090 -
DNA Bundles for NanoBRET® Target Engagement HDAC and BET BRD Assays
与 NanoBRET® Target Engagement HDAC and BET BRD Assays 一起使用
专为在 NanoBRET® TE Assay 中分析 HDAC 或 BET BRD 蛋白而设计的融合蛋白表达载体的组合套装
转染级别的质粒，NanoBRET® TE Intracellular HDAC (N2170) 和 BET BRD (N2180) 完整试剂盒的一部分，可单独购买N2120, N2150 -
NanoBRET®TE Intracellular E3 Ligase Assays
定量化合物对活细胞中的CRBN或VHL E3泛素连接酶的细胞内亲和力
执行简单的工作流程即可计算化合物的细胞内利用度（通透性的度量），帮助确定化合物的优先级
检测体系可放大或缩小；只需“添加”步骤即可完成操作
通过小分子（例如PROTAC或分子胶）降解蛋白质的过程需要多个步骤。初始步骤涉及小分子降解剂化合物进入细胞，然后与E3泛素连接酶和蛋白质靶标结合。 NanoBRET®TE Intracellular E3 Ligase Assays既可定量细胞内的靶标结合，又可测定细胞内降解剂化合物的利用度（availability）N2910, N2911, N2912, N2930, N2931, N2932 -
NanoBRET®TE E3 Ligase Vectors
用于NanoBRET® TE E3 Ligase Assays的 NanoLuc® E3 连接酶融合蛋白表达载体和 DDB1 表达载体
可用于表达与 E3 连接酶 CRBN 或 VHL 蛋白融合的 NanoLuc® 萤光素酶的转染载体
表达 DDB1 蛋白的转染级别载体
将这些载体与 NanoBRET® TE Intracellular E3 Ligase Assays,（CRBN 或 VHL）一起使用，检测 E3 连接酶的靶点相互作用N2741, N2751, N2761 -
NanoBRET®TE Intracellular RAS Assay
定量检测活细胞中 RAS 突变体的化合物亲和力和靶标占有率
跨多种 RAS 变异体（包括 KRAS、HRAS 及热点突变体）分析化合物的选择性
方便即用的检测方法，采用简单的“添加-读取”的工作流程
NanoBRET®TE Intracellular RAS Assay 基于NanoBiT®的原理，该系统使用独特的SmBiT(q)肽，使NanoBiT®萤光素酶对Extracellular NanoLuc® Inhibitor敏感，允许这种抑制剂消除来自受损细胞和细胞碎片产生的信号，以确保 NanoBRET® 信号源自活细胞N8010, N8012, N8013 -
NanoBRET® 590 Dyes
用于开发新型 NanoBRET® 示踪剂，实现新靶点的靶标占据检测
利用与创建大多数 Promega NanoBRET® 示踪剂相同的 NanoBRET® 品牌相关的能量受体
将 NanoBRET® 590 SE 染料与含有活性胺基团的化合物结合在一起
使用 NanoBRET® 590 SE 染料的三种连接变体，从一种普通的起始材料中创建三种独特的示踪剂结构N5300, N5301, N5000, N5001, N5100, N5200, N5201
