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HaloTag®蛋白标签技术及应用
简介
HaloTag® 蛋白标签技术是基于经过改造的催化活性缺失的细菌 水解酶，蛋白大小为 34kDa，在生理条件下能与氯化烷烃配基 (HaloTag® 配基 ) 结合形成高度特异性不可逆的共价键。通过使用不同的配基可控制带有 HaloTag® 蛋白标签的待测蛋白的功能和应用。HaloTag® 系统具有从细胞学实验到生化实验的广泛的应用灵活性，无需转换融合蛋白标签或者重新克隆。
产品或技术关键词
细胞成像 蛋白分析 蛋白互作 蛋白降解
讲座主要相关产品
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pHTC HaloTag® CMV-neo Vector
简单的多克隆位点（MCS）质粒
C末端HaloTag®载体
用于传统克隆G7711 -
pFC27A-and-pFC27K-HaloTag®-CMV-neo-Flexi®-Vectors
HaloTag® C末端Flexi®载体用于蛋白编码序列的方向性克隆
在Flexi®载体间进行蛋白编码区域转移，无需重新测序
载体可选抗性氨苄青霉素（A）或卡那霉素（K）G8421, G8431 -
pFC14A and pFC14K HaloTag® CMV Flexi® Vectors
将HaloTag添加到融合的伴侣蛋白的C末端
在哺乳动物细胞中实现组成型蛋白表达
包含CMV即刻-早期增强子/启动子
适用于稳定或瞬时基因表达G9651, G9661 -
pHTN HaloTag® CMV-neo Vector
多克隆位点（MCS）质粒，用于传统克隆
使用CMV启动子在哺乳动物细胞中实现高水平的组成型蛋白表达
多克隆区域便于克隆
适用于瞬时或稳定基因表达G7721 -
pFN28A-and-pFN28K-HaloTag®-CMV-neo-Flexi®-Vectors
添加N末端标签以在哺乳动物细胞中实现高水平蛋白表达
在哺乳动物细胞中实现组成型蛋白表达
包含CMV即刻-早期增强子/启动子
适用于稳定或瞬时基因表达G8441, G8451 -
pFN21A HaloTag®-CMV-Flexi®-Vector
将HaloTag®添加到融合的伴侣蛋白的N末端
在哺乳动物细胞中实现组成型蛋白表达
包含CMV即刻-早期增强子/启动子
适用于稳定或瞬时基因表达G2821 -
pH6HTN and pH6HTC His6HaloTag® T7 Vectors
用于大肠杆菌和无细胞蛋白表达的双蛋白融合标签克隆载体
可以选择N-或C-末端融合选项
使用聚组氨酸标签或HaloTag® ORF进行蛋白表达和分析
通过PCR或限制性内切酶消化克隆蛋白编码区G8031, G7971 -
pFN29 and pFC30 His6HaloTag® T7 Flexi® Vectors
HaloTag®-6xHis 双标签细菌表达载体
可在大肠杆菌T7无细胞表达系统中表达蛋白
将HaloTag®技术的蛋白质溶解性和标记优势与Ni-亲和技术的可重复使用性和通量相结合
选择N-或C-末端标签，以及氨苄青霉素或卡那霉素抗性G8321, G8381, G8261, G8331 -
HaloTag® Mammalian Pull-Down Systems
识别更多生理性相关的蛋白质伴侣
直接从裂解物中快速捕获简单和复杂的蛋白质对
使用相同的载体实现从pull-downs到成像研究G6500, G6504, G6509, G6591 -
NanoBRET® Nano-Glo® Detection System
NanoBRET®蛋白相互作用检测的专用解决方案
在活细胞中使用全长蛋白测定蛋白相互作用
使用标准试剂进行单时间点或<2小时动态分析
使用动力学试剂进行延长的活细胞动态测定
与传统BRET测定相比，信号增强且背景更低N1661, N1662, N1663 -
pFN31 and pFC32 NanoLuc® Protein Fusion Flexi® Vectors
用于与NanoLuc®萤光素酶报告基因的N端或C端融合
使用Flexi®载体系统插入感兴趣的蛋白
选择N端或C端的NanoLuc®融合和抗生素抗性（氨苄青霉素或卡那霉素）
明亮的NanoLuc®报告基因允许融合蛋白以内源水平表达，从而获得更生理相关的结果N1311, N1321, N1331, N1341 -
NanoBRET® PPI Control Pair (p53, MDM2)
优化的载体对，用于通过NanoBRET®检测来测定蛋白伴侣p53和MDM2的相互作用
在进行仪器设置时使用，或在进行其他NanoBRET® PPI测定时作为参考对照对使用N1641 -
Flexi® Cloning System
定向克隆蛋白编码序列
可从多种初始应用中进行选择（例如细菌蛋白、哺乳动物蛋白或无细胞蛋白表达），然后根据需要转移插入片段
高效的插入片段转移意味着可直接使用重组克隆，筛选背景克隆所需时间极少
适用于高通量格式，可用于大型筛选项目C8820, C8640, C9320 -
Flexi® Cloning System
蛋白编码序列的方向性克隆
多种初始应用（例如，细菌蛋白、哺乳动物或无细胞蛋白表达）可以选择，之后还可根据需要转移插入片段到其他应用系统
高效的插入片段转移意味着可以直接使用重组克隆，最小化筛选背景菌落的时间
适用于高通量模式的大型筛选项目C8820, C8640, C9320 -
pNLF1 NanoLuc® Protein Fusion Vectors
生成与NanoLuc®酶的N-或C-末端融合，或与N-末端分泌型NanoLuc®萤光素酶的融合
使用传统的克隆技术将感兴趣的蛋白插入到多克隆位点（MCS）中
明亮的NanoLuc®报告基因使得融合蛋白能够实现内源水平表达，从而获得更具生物学相关性的结果
选择瞬时转染或使用潮霉素筛选稳定表达N1361, N1351, N1371 -
HaloLink™ Resin
HaloTag®融合蛋白与固体表面的共价、定向结合
共价结合使得可以进行严格的洗涤，从而最小化非特异性背景
快速的结合动力学增强了蛋白质：蛋白质相互作用的检测，使得在低蛋白浓度下也能进行结合
一毫升树脂可以结合超过7毫克的HaloTag®融合蛋白G1912, G1913, G1914, G1915 -
HaloTag® Protein Purification System
与HaloTag®配体一起使用，增强重组蛋白的表达和溶解性
共价、高效和特异性地捕获您感兴趣的蛋白质
克服亲和力标签相关的限制（例如，低表达水平蛋白质的捕获不良，洗涤过程中的蛋白质丢失）
提供样品大小（选择Cat.# G6270）G6280, G6270 -
HaloTag® Mammalian Protein Purification System
从哺乳动物细胞培养物中回收高纯度的重组蛋白，即使在低表达水平下
HaloLink™树脂共价结合>7mg/ml的HaloTag®融合蛋白（比FLAG®高10倍的容量）
易于放大或缩小以获得毫克级以上的蛋白质量
可选择纯化或纯化+检测试剂盒G6795, G6790 -
Magne™ HaloTag® Beads
磁性捕获HaloTag®融合蛋白用于沉淀和纯化
每毫升颗粒可结合≥20毫克的纯化HaloTag®融合蛋白
适用于手动或高通量应用G7281, G7282 -
HaloTag ® Fluorescent Ligands
将荧光标签或亲和标签共价连接到膜蛋白或细胞内蛋白
细胞通透性的TMR、Oregon Green®、diAcFAM和香豆素配体可以轻易穿过细胞膜以标记细胞内蛋白
非细胞通透性的标签，如Alexa Fluor® 488和660，现在以新的冻干形式提供
冻干配体可溶于细胞培养基或水性缓冲液中HT1120, G1002, G1001, G8472, G8471, G8252, G8251, G8282, G8281, G8582, G8581, G8273, G8272, G2802, G2801, G8592, G8591, G3221, G2991, HT1130 -
Anti-HaloTag® pAb
用于检测HaloTag®融合蛋白的多克隆兔抗体
特异性针对HaloTag®蛋白
对大肠杆菌和哺乳动物细胞提取物交叉反应低
供应浓度为1mg/mlG9281 -
Anti-HaloTag® Monoclonal Antibody
针对HaloTag®蛋白的单克隆抗体
与其他非HaloTag®蛋白交叉反应极小
可通过Western blot检测到低至0.5–1ng的HaloTag®融合蛋白
供应浓度为1mg/mlG9211 -
Janelia Fluor® HaloTag® Ligands
Janelia Fluor® HaloTag® Ligands适用于活细胞高分辨率成像和标准共聚焦成像
可进行快速单分子标记
具有高信噪比与特异性
相较于荧光蛋白增强了亮度
冻干配体在细胞培养基或水性缓冲液中可溶
每一份五瓶包装的冻干粉配体产品包含5份1nmol每瓶的小剂量配体HT1080, HT1020, GA1110, GA1111, HT1090, HT1060, GA1120, GA1121, HT1050, HT1040, HT1010, HT1030, HT1070, HT1100, HT1110, CS315102 -
HaloTag® Ligand Building Blocks
使任何带有指定功能团的报告基因、蛋白质或核酸能够与HaloTag®蛋白一起使用
对表达HaloTag®蛋白或蛋白融合体的活细胞或固定细胞成像
分析翻译后修饰
分离蛋白质和蛋白质复合物P6711, P6741, P1691, P6751
