高质量的体外转录（IVT）产物对于研究和RNA疗法开发至关重要。然而，IVT过程可能会产生双链RNA (dsRNA)副产物，这种污染物会对药物物质和产品造成显著的负面下游效应，例如高免疫原性。因此，对dsRNA进行灵敏和定量的评估对于控制和优化mRNA治疗和疫苗制造过程非常关键。

Lumit^® dsRNA Detection Assay提供了一种新颖的定量样品中dsRNA的方法。Lumit^®检测技术是基于NanoBiT^® 萤光素酶互补的技术。 NanoBiT^® 的两个亚基，SmBiT 和 LgBiT，被遗传融合到dsRNA结合蛋白上。在dsRNA存在的情况下，SmBiT 和 LgBiT 亚基会聚集形成一个活性NanoBiT^® 萤光素酶，产生一个与样品中dsRNA量成正比的发光信号。结果是浓度依赖性的发光信号，可以实现对dsRNA的定量和特异性检测。

注意：每套试剂的总检测数量将根据最终孔体积而变化。

对于标准孔体积：

基于溶液的均质型检测：

• 不需要洗涤或样品转移步骤；
• 适用于高通量应用。

Lumit^® dsRNA检测试剂盒展现出卓越的批内和批间精密度，以及极低的检测限。

使用Lumit^® dsRNA检测试剂盒在一系列dsRNA浓度下生成的标准响应曲线。每个点代表六次重复测量的均值，数据来自三次独立实验。所有测量值均使用GloMax^® Discover板式发光检测仪记录。经计算，该检测方法的检测限（LoD）为0.37 pg/ml，定量限（LoQ）为1.12 pg/ml，充分体现了其卓越的灵敏度和可重复性。

在三次实验中，对三种浓度的dsRNA分别进行了16次重复检测。通过标准曲线进行线性插值，计算得出平均表观浓度。	对三种浓度的dsRNA进行了检测，每种浓度重复16次。通过标准曲线进行线性插值，计算得出平均表观浓度。

Lumit^® dsRNA Detection Assay能够在混合RNA种类的体外转录（IVT）样本中准确地定量dsRNA。

Lumit^® dsRNA Detection Assay能够在混合RNA种类的IVT样本中对dsRNA进行定量。IVT样本分别经过了±RNase I_f（ssRNA特异性）或RNase III（dsRNA特异性）处理；对总RNA（使用QuantiFluor^® RNA测定）和dsRNA（使用Lumit^®技术测定）均进行了定量。

左图显示：用RNase I_f消化ssRNA显著减少了总RNA的量，但并未影响所检测到的dsRNA的量。

右图显示：用RNase III将dsRNA消化成≤20bp的片段后，在Lumit^® dsRNA Detection Assay中导致了信号的完全丧失。