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Promega的科学家团队助力新研究提高突破性基因编辑技术的精确度和效率
美国威斯康辛州麦迪逊市, (2023-08-21)一项发表于《Nature Communications》期刊的新研究阐述了小分子抑制剂在提高CRISPR-Cas9基因编辑的精确度和效率方面的应用。研究结果证明,联合使用两种抑制剂能够提升这一突破性技术,从而提高基因插入率,减少脱靶效应。这一发现对推进CRISPR技术在多种细胞系的研究和临床应用中的使用尤为关键。
利用CRISPR-Cas9提高基因组编辑
自2012年发布以来,基因组编辑系统CRISPR-Cas9已经成为生物医学研究必不可少的工具。研究人员可利用该系统对特定位置的DNA进行切割,并插入或剔除遗传物质,从而实现以往不可能达到的基因操作水平。
在这篇发表在《Nature Communications》的期刊文章中,作者们对一个包含20548个小分子的文库进行了分析,并开发了相应的策略来改进这一基因编辑技术。他们识别鉴定了两种靶向DNA依赖性蛋白激酶(DNA-PK)和DNA聚合酶θ(Polθ)蛋白质的抑制剂,并证明这两种分子联合使用可极大提高基因编辑“敲入”的性能。这种被称为2iHDR的策略优于以往所述的旨在利用小分子抑制剂提高敲入效率的策略。
该文章还记载了一个基于新一代测序(NGS)的新系统,该系统可用于描述抑制剂对CRISPR-Cas9的影响。作者将该系统命名为KI-Seq,可开放获取。研究者在进行CRISPR-Cas9基因编辑后,可采用KI-Seq对不同DNA修复途径的作用进行分析。
KI-Seq系统与同类工具不同,可用于包括非分裂原代细胞在内的任何细胞类型的分析。
该研究由AstraZeneca的科学家主导,Promega的研究科学家Marie Schwinn 和Michael Slater在该研究中做出了一定的贡献。
登录www.promega.com/CRISPR了解Promega的更多与CRISPR-Cas9联合使用的技术。
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