新品 | GloMax® Galaxy 细胞成像仪-让您的研究"眼见为实"!
通过生物发光成像可视化您的NanoLuc®萤光素酶检测
GloMax® Galaxy细胞成像仪是一款功能齐全的显微镜,专为可视化NanoLuc®萤光素酶(荧光素酶)化学反应而设计。通过生物发光成像,将您的微孔板检测结果转化为精美直观且具有启发性的图像。
- 专为所有NanoLuc®技术(包括HiBiT、NanoBiT®和NanoBRET®)的可视化而开发。
- 验证您正在使用的生物发光报告基因实验,使数据可视化。
- 支持基于NanoLuc®萤光素酶技术的多种蛋白质报告基因应用。
GloMax® Galaxy可实现以下内容的可视化:
- 蛋白质-蛋白质相互作用
- 蛋白质定位与转运
- 蛋白质降解与稳定性
- 配体-蛋白质相互作用(靶点结合)
- 靶向细胞杀伤
图:GloMax® Galaxy 对融合HiBiT蛋白标签的EGFR蛋白质的发光成像
低丰度内源性蛋白质成像
生物发光技术使得对低表达量内源性蛋白的成像成为可能。相较于荧光成像,生物发光产生的光子通量较低,因此只需极少光子即可检测到报告基因信号。虽然目标蛋白表达水平越高所需的曝光时间越长(与荧光成像相比),但生物发光成像具有显著优势——由于样本本身不存在自荧光或自身发光现象,其背景噪声可降至最低水平。
相对发光单位(RLU)是读板仪中用于表征低表达蛋白的常用指标。由于生物发光本身具有较低的信噪比背景,研究者可通过延长样本曝光时间的方式检测到极低表达量的目标蛋白。
低丰度蛋白质的生物发光成像
图A:低丰度内源性蛋白质显示出较低的发光信号。NanoBiT®融合蛋白的相对发光单位(RLU)显示,高丰度(CFL)和低丰度(HDAC6)内源性蛋白质之间的发光信号相差2个数量级。
图B:在GloMax® Galaxy上捕获的低丰度和高丰度内源性NanoBiT®融合蛋白图像。通过CRISPR/CAS9技术在HeLa细胞中将HiBiT插入目标蛋白的基因组位点。LgBiT异位表达,二元互补形成目标蛋白质-NanoBiT®融合。高丰度CFL的图像需要1分钟曝光,而低丰度HDAC6的图像需要3分钟曝光
实时监测蛋白质动力学
生物发光成像的主要优势之一在于其信号具有固有的稳定性和可持续性。与荧光标记不同,生物发光信号不需要外部激发。这种无需外部激发的特性降低了光毒性和光漂白的风险,而这些问题通常会随着时间的推移对细胞活性和信号完整性产生不利影响。
生物发光标记允许在数天、数周甚至数月内进行重复成像,而不会改变研究系统的生理状态。此外,由于生物发光的光子通量较低,能够更容易观察到反映蛋白质变化的生物发光信号的细微变化。这对于研究靶向蛋白质降解尤为理想。
靶向蛋白质降解的时间动态监测
内源性表达HiBiT标记的GSPT1并稳定表达LgBiT的HEK293细胞,经过CC-885降解剂或DMSO对照处理。使用Nano-Glo® Vivazine™活细胞底物进行检测,并通过GloMax® Galaxy与Stagetop恒温控制器在5小时内进行成像。
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