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CytoTox 96®Non-Radioactive Cytotoxicity Assay(G1780) 细胞介导的细胞毒性实验优化方法
相关产品目录号:G1780
产品分类:细胞健康检测技术
问题类型:技术/操作答疑
产品关键词:细胞杀伤 比色法
CytoTox 96® Non-RadioactiveCytotoxicity Assay是一种检测细胞膜受到破坏后释放出乳酸脱氢酶(LDH)的量从而检测细胞毒性的检测试剂盒。而这种特性可以应用于多种细胞介导的细胞毒性检测中,检测靶细胞受到效应细胞作用后带来的细胞膜破损从而释放的LDH。
CytoTox 96® Non-RadioactiveCytotoxicity Assay采用的是传统的比色法,受到比色法线性范围窄等因素的影响,经常出现细胞杀伤窗口较窄,细胞杀伤效果不明显。通常出现这种现象的原因为靶细胞或效应细胞自发释放较高,从而影响到细胞毒性的计算。靶细胞或效应细胞自发释放较高的原因通常是培养条件或操作原因导致细胞膜“渗漏”。
减小细胞自发释放的主要方法是:进行靶细胞数目的优化,培养时保证细胞密度不要太高,饲以新鲜培养基。避免培养基或PBS溶液有大的温度波动。
当重悬细胞沉淀时避免剧烈吹吸,保持离心力≤250 x g或者用更低的转速离心。
另外,如果靶细胞或效应细胞是原代分离培养的细胞,刚分离时也可能有较多的死细胞,应该培养一段时间待其恢复到健康状态再进行实验。