FAQ

常见问题

您可在常见问题数据库中通过筛选项或者搜索引擎查找您感兴趣的产品的常见问题,如果没有您感兴趣的产品,您还可通过技术支持页面留下您的疑问,Promega技术专家会尽快与您取得联系,回答您的问题。

CytoTox 96®Non-Radioactive Cytotoxicity Assay(G1780)细胞介导的细胞毒性实验靶细胞数目优化方法

相关产品目录号:G1780

产品分类:细胞健康检测技术

问题类型:技术/操作答疑

产品关键词:细胞杀伤 比色法

靶细胞数目的优化:

在进行相关检测前,推荐您对测定的靶细胞进行数目的优化。

您可以按照说明书中所述方法进行靶细胞数目的优化:

采用050001000020000/100µl浓度的靶细胞进行铺板。加入裂解液后离心,将50µl上清转移到检测孔板中,加入检测试剂后孵育30min终止反应,然后进行490nm吸收光检测。

按照上述检测方法,您会得到一条横轴是细胞数目和纵轴是吸光度的直线。如果细胞数目过多,这条线可能会到平台期,细胞数目(释放的LDH)不会与吸光度线性相关;

如果过少,会接近背景值,实验的变化窗口会非常窄,不利于之后的研究。比较理想的细胞数目既可以有较好的信噪比,又不会超出线性相关的范围(考虑到效应细胞自发释放也会贡献一部分LDH,靶细胞最大释放的信噪比也并不是越大越好)。

不同浓度的靶细胞数目测定,●=K-562■=CEM, ▲=HSB-2,因为三种细胞系中LDH表达量的差异,需要采用不同的靶细胞数目进行LDH的测定。

电话:010-58256268

技术支持邮箱:chinatechserv@promega.com