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萤光素酶检测需要使用什么检测板?
相关产品目录号:E1910,E1501,E2920,N1110,G7570,G8090
产品分类:萤光素酶报告基因技术及应用
问题类型:产品选择指导
产品关键词:
实验室常用的检测板有几类:
l 全透明板(Clear plates)
l 全白色不透光平板(White Plates, Solid Bottom)
l 白色侧壁透明底的平板(White Plates, Clear Bottom)
l 全黑色不透光平板(Black Plates, Solid Bottom)
l 黑色侧壁透明底的平板(Black Plates, Clear Bottom)
萤光素酶反应(生物发光反应)产生的光来自样品中发生的酶反应,不需要外来的光源激发,而且样品中除了反应产生的光,没有其他光源,背景低。对于发光反应,使用全透明板会有明显的相邻孔之间的信号干扰,不合适。另外四种板都可以避免大部分的孔间相互干扰,理论上都可以使用。相比之下,黑色的板会吸收光信号,降低背景(在发光反应中没有必要),也降低检测的灵敏度,不推荐。如果是使用发光与荧光检测叠加的系统,使用黑板和白板都可以,但黑板的信号会比白板低大约一个数量级。透明底的孔板优势是可以在实验过程中观察培养的细胞,全白板的优势是灵敏度最高而且孔间相互干扰最小。以96孔板为例,常见的实验方案和选择建议如下:
- 在普通的透明细胞培养板中养细胞,加检测试剂待细胞裂解后,把样品转移到全白检测板中(如Corning #3912),这样的板子价格便宜一些,但需要转板,使操作变复杂且容易引入误差;
- 在底透明、壁不透光的细胞培养级的白板中培养细胞和检测(如Corning #3903),这样的板子可以方便的观察细胞形态,进行发光检测时可以在板子底部贴一张白纸或白色微孔板封板膜(Microplate Sealer)以降低孔与孔之间光信号的交叉干扰;
- 在壁和底都不透光的细胞培养级的白板中培养细胞和检测(如Corning #3917),这样的板子无法观察细胞状态,对操作要求比较高。
- 用于活细胞实时监测的发光反应,需要直接将活细胞接种在细胞培养级别的全白检测板(如Corning #3917)或者白色透明底的平板(如Corning #3903)。
*微孔板封板膜(Microplate Sealer)建议:
Nunc white polyester sealing tape Catalog Number 235305
USA Scientific Light reflecting film Catalog Number 2998-6550
Perkin Elmer white seals Catalog Number 6005199
更多检测用平板型号推荐:
Plates for Biochemical Assays |
||||||
96-well White Plates suitable for luminescent biochemical assays (no cells) |
||||||
Brand |
Plate Name |
Catalog Number |
Color |
Material |
Well Shape |
Special Features |
Corning |
96 Wells White |
3912 |
White |
PS |
Flat |
Opaque |
Corning |
96 Wells White |
3600 |
White |
PS |
Flat |
Opaque |
NUNC |
96 Wells White |
236105 |
White |
PS |
Flat |
Opaque |
NUNC |
96 Wells White |
265302 |
White |
PS |
Flat |
Clear Bottom |
PS=Polystyrene |
||||||
96-well Black Plates suitable for fluorescent biochemical assays (no cells) |
||||||
Brand |
Plate Name |
Catalog Number |
Color |
Material |
Well Shape |
Special Features |
Corning |
96 Wells Black |
3915 |
Black |
PS |
Flat |
Opaque |
Corning |
96 Wells Black |
3650 |
Black |
PS |
Flat |
Opaque |
NUNC |
96 Wells Black |
237105 |
Black |
PS |
Flat |
Opaque |
NUNC |
96 Wells Black |
265301 |
Black |
PS |
Flat |
Clear Bottom |
Cell-Based Assays |
||||||
96-well White TC Plates suitable for luminescent cell-based assays |
||||||
Brand |
Plate Name |
Catalog Number |
Color |
Material |
Well Shape |
Special Features |
Corning |
96 Wells White |
3917 |
White |
PS |
Flat |
Opaque, With Lid |
Corning |
96 Wells White |
3903 |
White |
PS |
Flat |
Clear Bottom |
96-well Black TC Plates suitable for fluorescent cell-based assays |
||||||
Brand |
Plate Name |
Catalog Number |
Color |
Material |
Well Shape |
Special Features |
Corning |
96 Wells Black |
3916 |
Black |
PS |
Flat |
Opaque, With Lid |
Corning |
96 Wells Black |
3904 |
Black |
PS |
Flat |
Clear Bottom |
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应用文献
技术视频