ApoLive-Glo™ Multiplex Assay
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在同一反应孔内,ApoLive-Glo™ Multiplex Assay (ApoLive-Glo™ 多重检测试剂盒) 既能检测以存活细胞数量作为标志的细胞毒性,又能检测以caspase 活性为标志的细胞凋亡,从而确定细胞死亡的机理。
该试剂盒的第一部分检测标志细胞活力的活细胞蛋白酶的活性。活细胞蛋白酶活性仅存在于完整活细胞中,可利用能够产生荧光、可渗透进入细胞的多肽底物 ( 甘氨- 酰苯丙- 氨基荧光香豆素;GF-AFC) 进行检测。该底物进入胞膜完整的细胞后,随即被活细胞蛋白酶剪切,并产生荧光信号,信号强度与活细胞数量成正比。一旦细胞膜丧失完整性并渗漏至周围培养基,活细胞蛋白酶也立即失活。
该试剂盒的第二部分采用Caspase-Glo® 检测技术来检测caspase 的活化,caspase 是细胞凋亡的关键生物标志物。Caspase-Glo® 试剂盒提供能发光的caspase-3/7 底物,该底物含有四肽序列DEVD,试剂盒中的试剂针对caspase 活性、萤光素酶活性及细胞裂解作了优化。
以“加样- 混合- 检测“的模式,加入Caspase-Glo® 3/7 试剂将导致细胞裂解,随后caspase剪切底物并产生由萤光素酶反应产生的“辉光型”萤光信号。萤光强度与存在的caspase 活性成正比。
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