P450-Glo™ CYP1A2 Assay and Screening Systems
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P450-Glo™ CYP1A2 Assay为测定细胞色素P450 CYP1A2活性提供了一种均质的发光检测方法。该检测系统使用的P450发光前体底物是甲虫萤光素(beetle luciferin)的衍生物,甲虫萤光素是萤光素酶的底物。此衍生物本身不是萤光素酶的底物,但是当P450酶将其转化为萤光素时,即成为萤光素酶底物,并与萤光素酶反应而产生光,光强度与P450活性成正比。
该发光检测方法具有卓越的灵敏度、极低的背景信号和宽广的动态范围。它产生的“辉光型”发光信号,是通过把作为P450底物的萤光素衍生物、重组的稳定化的萤光素酶(Ultra-Glo萤光素酶)与专有的缓冲系统结合起来而实现的。发光信号的半衰期大于2小时,因而不要求发光检测仪必须带有自动进样器,并可实现样品板批量处理。发光模式还去除了对诸如HPLC之类的耗时分析的需要。
P450-Glo™ CYP1A2 Screening System(P450-Glo™ CYP1A2筛选系统)提供了一套完整的用于进行发光法细胞色素P450酶活性检测的试剂。该系统包括含有重组人细胞色素P450酶的膜制备物、细胞色素P450亚型所对应的发光前体底物、NADPH再生系统、反应缓冲液、萤光素检测试剂和无萤光素的水。膜制备物是从感染了杆状病毒的昆虫细胞制备而来,并含有人细胞色素P450酶、P450还原酶和细胞色素b5。P450-Glo™筛选系统还含有缺失细胞色素P450活性的膜制备物,作为阴性对照使用。该检测系统非常适合用来测试药物和新化学实体(new chemical entities)对细胞色素P450酶活性的影响。
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