P450-Glo™ CYP2C8 Assay System
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P450-Glo™ CYP2C8 Assay为测定细胞色素P450 CYP2C8活性提供了一种均质的发光检测方法。该检测系统使用的P450发光前体底物是甲虫萤光素(beetle luciferin)的衍生物,甲虫萤光素是萤光素酶的底物。此衍生物本身不是萤光素酶的底物,但是当P450酶将其转化为萤光素时,即成为萤光素酶底物,并与萤光素酶反应而产生光,光强度与P450活性成正比。
此发光检测方法具有卓越的灵敏度、极低的背景信号和宽广的动态范围。它产生的“辉光型”发光信号,是通过把作为P450底物的萤光素衍生物、重组的稳定化的萤光素酶(Ultra-Glo萤光素酶)与专有的缓冲系统结合起来而实现的。发光信号的半衰期大于2小时,因而不要求发光检测仪必须带有自动进样器,并可实现样品板批量处理。发光模式还去除了对诸如HPLC之类的耗时分析的需要。
基于萤光素的底物很容易被细胞摄取并在细胞内快速转化为萤光素,因此减少了所需的孵育时间(通常为30-60分钟)。P450-Glo™ CYP2C8检测系统的其他优点包括:其独特配方可以最大限度地降低筛选细胞色素P450抑制剂时因待测物对萤光素酶的抑制而带来的假阳性发生率;在96孔或384孔板模式中可实现大于0.8的Z'值,并且能提供高度可预测的结果。
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