Kinase-Glo® Luminescent Kinase Assays

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Kinase-Glo® Luminescent Kinase Assays (Kinase-Glo® 激酶发光检测试剂盒) 是一种均质的非放射性的方法，用于检测激酶反应后溶液中ATP 的剩余含量来定量地检测纯化激酶的活性。此试剂盒为多孔板检测模式而设计，是自动化高通量筛选(HTS) 的理想选择，可被用于检测蛋白质、脂质和糖激酶。整个操作过程只需在激酶的完全反应中加入单一的溶液即可。溶液加入后会产生与ATP 含量相关的发光信号，而该信号的强弱与激酶的活力成反比。Kinase-Glo® 试剂盒产生的" 辉光型" 发光信号是由专利技术的萤光素酶 (Ultra-GloTMLuciferase) 和独有的缓冲液系统产生的。当在检测时存在激酶反应缓冲液( 如PKA 的反应缓冲液) 的情况下，其发光信号的半衰期超过 5 个小时，因此不需用带有进样器的发光检测仪，可以直接进行批量处理。该试剂盒无论在96孔板还是384孔板分析时都有非常好的Z'-值( 通常高于0.7)，可以很容易检测到已知的激酶抑制剂，并且产生的IC50 值与文献所报道的相当。


Kinase-Glo® 检测系统可根据其对 ATP 线性反应的不同进行区分。最初的 Kinase-Glo® 试剂在 10μM 范围内和 ATP 存在线性关系；Kinase-Glo® Plus 试剂在 100μM 范围内和ATP 存在线性关系；最新的Kinase-Glo® Max 检测方法在 500μM 范围内和 ATP 存在线性关系，非常适用于Km 常数高的激酶的 ATP 检测，也适用于筛选不竞争 ATP 结合位点的激酶抑制分子。
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