NAD/NADH-Glo™ and NADP/NADPH-Glo™ Assays

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NAD/NADH-Glo™ Assay 是一种均质的化学发光检测试剂盒，能够检测总的氧化型和还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD+ 和 NADH)，并确定NAD+ 和NADH在生物样品或特定酶学反应中的比值。 NAD 循环酶用于将NAD+ 转换为NADH。在NADH 存在时，试剂盒所提供的还原酶将 proluciferin( 还原酶底物 )还原成萤光素。萤光素通过 Ultra-Glo™ 重组萤光素酶定量，反应产生的光信号正比于样品中的 NAD+ 和 NADH 的量。 NAD 循环酶和还原酶所驱动的 NAD+ 和 NADH 循环增加了检测的灵敏度和选择性，使得试剂盒只检测非磷酸化的 NAD+ 和NADH，而不会检测磷酸化形式的 NADP+ 和NADPH。 

NAD 循环酶、还原酶和萤光素酶反应是通过将等体积的NAD/ NADH-Glo™ Detection Reagent 加入NAD+- 或 NADH- 样品中而被启动，检测试剂中包含NAD 循环酶和底物、还原酶、还原酶底物和 Ultra-Glo™ rLuciferase，同时检测试剂中存在的去污剂可将细胞裂解， 这样通过加入单一试剂即可检测多孔板中细胞内总 NAD+ 和 NADH 的含量。另外，我们也提供了可单独测量NAD+ 和 NADH、计算NAD+ 和 NADH 比例的操作手册。简单的“加样- 混合- 检测”操作方案和灵活、可扩展的检测方法使得 NAD/NADH-Glo™ Assay 非常适合高通量筛选小分子化合物对 NAD 和NADH 水平的影响。