pGEM®-T Vector Systems
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pGEM® -T 载体系统是克隆PCR 产物的方便系统。pGEM®-T 载体是通过EcoRV 酶切pGEM®-5Zf(+) 载体,并在两个3' 末端加入 胸腺嘧啶构建的。pGEM®-T 载体插入位点3'-T 突出端可极大提高 PCR 产物的连接效率,因为 3'-T 突出端可以防止载体的自身环化, 并且为某些热稳定性聚合酶产生的 PCR 产物提供一个匹配碱基。这 些聚合酶常常以模板不依赖模式在扩增产物的3' 端加上一个脱氧腺 苷酸。 pGEM® -T 载体多克隆区 T 突出端的两侧均有 BstZI 酶切位点, 使用 BstZI 单酶消化即可释放插入片段。也可选用适当的双酶消化释 放插入片段。pGEM® -T 载体系统II 除了pGEM® -T 载体系统I 所有 成分外,还包括 JM109 感受态细胞。
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