pF1 T7 Flexi® Vectors
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pF1A和pF1K T7 Flexi® 载体可以用于在含有T7 RNA聚合酶的大肠杆菌和无细胞蛋白表达系统中表达无标签蛋白。蛋白表达量根据目的蛋白特点而定。
Flexi® 载体系统是一种简单的蛋白编码序列的定向克隆方法。该方法建立在两种位点稀有的限制性酶Sgfl 和 Pmel 基础上,可以将蛋白编码区在不同的 Flexi® 载体之间转换,而不需要重新测序,该方法快速,有效,保真度高。只有两个N-末端标记的载体或者从 N-末端到 C-末端的载体可以发生直接转化。
注意: Flexi® 载体带有致死性 barnase 基因,可以减少载体构建过程中不带有插入片段的阴性克隆的产生。 barnase 基因可被插入的目的 DNA 片段所替代。在没有插入目的 DNA 片段的情况下,所购买的这一类载体无法在常用实验室大肠杆菌菌株生长。
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