GSH/GSSG-Glo™ Assay

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GSH/GSSG-Glo™ Assay (GSH/GSSG-Glo™ 检测试剂盒) 是利用发光法检测和定量培养细胞中的总谷胱甘肽(GSH+GSSG)、GSSG以及GSH/GSSG 比率的检测系统。GSH 水平的改变对细胞毒性反 应的评价非常重要,并且是氧化应激的重要指标,可能引起细胞凋亡或细胞死亡。该试剂盒提供了一种简单的多孔板模式,稳定的发光信号直接与培养孔中样品的总谷胱甘肽(GSH+GSSG) 或GSSG 的浓度相关联。总谷胱甘肽和GSSG 的检测都基于GSH 依赖的转化反应:GSH 探针Luciferin-NT 在谷胱甘肽S 转移酶的催化作用下,转变为萤光素,并与萤火虫萤光素酶反应偶联。 萤光素酶反应产生的光信号依赖于上述转化反应形成的萤光素的含量,而萤光素的含量又依赖于存在的GSH 的含量;这就使得发光信号与GSH 的含量成正比。总谷胱甘肽与GSSG 的检测反应平行进行。在一个反应中,检测试剂用于测定谷胱甘肽的总含量,通过用还原试剂将细胞裂解液中的所有谷胱甘肽(GSH+GSSG)都转变为还原型谷胱甘肽GSH 来实现。在另一个反应中,检测试剂只用于测定氧化型谷胱甘肽GSSG 的含量。在该检测中,先用一种试剂阻断所有的GSH,保持GSSG 不变,之后将GSSG 还原为GSH,并用发光反应来定量。由于这些检测都是直接在培养细胞中进行,从而使得GSH 或GSSG的损失最小,减少了可变性。

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