cAMP-Glo™ Assay

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cAMP-Glo™ Assay 是一种均质的、利用生物发光原理检测 细胞内cAMP水平的高通量方法。cAMP-Glo™ Assay 可检测出细 胞体内应答G 蛋白偶联受体(GPCR) 上的测试化合物效应而生成的 cAMP。与腺苷酸环化酶偶联的GPCRs 会升高或降低胞内的 cAMP。 这种检测方法的原理是:环状 AMP (cAMP) 促进蛋白激酶 A (PKA)全酶的活性,降低ATP,从而引起偶联的萤光素酶(luciferase) 反应光信号降低。 cAMP-Glo™ Assay 可在 96 孔、384 孔和 1536 孔培养板中进行。 用一种测试化合物在一段合适的时间内诱导细胞;诱导后,裂解细胞, 释放cAMP,接着加入含有蛋白激酶A 的 cAMP 检测溶液。然后加 入 Kinase-Glo® Reagent 终止PKA 反应,并用萤光素酶反应检测残 余 ATP。培养板放置于微孔板发光检测仪中读取数据。利用cAMP 标准曲线,发光值和 cAMP 的浓度相关联。发光信号的半衰期超过 3 小时。信号半衰期的延长使实验用的发光检测仪不再需要带有进样器,可以直接进行多个微孔板的批量处理。

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