GTPase-Glo™ Assay
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GTPase-Glo™ Assay (GTPase-Glo™ 检测试剂盒) 检测GTPase 循环中GTPases、GAPs 和GEFs 的活性,试剂盒检测在GTPase 反应中GTP 水解后GTP 的残余量。在GTPase-Glo™ 检测 试剂的作用下,反应剩余的GTP 转化为ATP,ATP 检测通过热稳定萤光素酶(Ultra-Glo™ Recombinant Luciferase) 催化的萤光素酶底物发光反应定量。试剂盒包含经优化的反应缓冲液,GTPase/GAP缓冲液用于GTPase 和GAP 反应,GEF 缓冲液用于GEF 反应。两种缓冲液主要区别在Mg3+ 含量,它对于GTPase 是否装载核苷酸十分重要,进而影响GTPase 循环。GTPase-Glo™ 检测试剂盒可检测GTPase 本身的活性、GAP- 刺激的GTPase 活性及GAP 和GEF活性。GTPase、GAP 和GEF 活性与发光信号值成反比。高活性的GTPase 水解更多的GTP,减少从GTP 转化的ATP 的量,减少光信号输出。低活性的GTPase 水解较少的GTP,剩余大量的GTP 转化为ATP,产生更大的光信号。
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