FcγRI ADCP Bioassay

购买产品

通过FcγRI结合和激活ADCP检测大分子药物的效能和稳定性

  • 证明FcγRI介导的 MOA
  • 检测抗体效能和稳定性
  • 对抗体和配基进行筛选和排序


关键词:Bioassay,ADCP,Fc受体,Fc effector,生物发光法

通过FcγRI测定抗体ADCP活性


抗体依赖性细胞介导的吞噬作用(ADCP)是治疗性抗体识别和介导消除病毒感染或病变(如肿瘤)细胞的重要作用机制(MOA)。 与抗体依赖性细胞介导的细胞毒性(ADCC)不同(ADCC主要通过在NK细胞上表达的FcγRIIIa介导),ADCP可以由单核细胞、巨噬细胞、中性粒细胞和树突状细胞通过FcγRIIa、FcγRI和FcγRIIIa介导。 在髓系细胞中,各种受体的表达水平是高度动态的,并受细胞系、组织微环境和局部炎症状态的影响。 这三种受体都能参与抗体识别、受体聚集和信号转导事件,导致ADCP的发生。


当前用于检测ADCP的方法依赖于人的原代单核细胞的分离,体外分化为巨噬细胞和靶细胞吞噬的测定。由于依赖供体原代细胞,复杂的检测流程和不合格的检测试剂,使得这些检测费时费力并且高度可变。结果就是,这些检测方法很难在质量控制要求较高的药物开发程序中建立。


FcγRI ADCP Bioassay是一种基于细胞的生物发光检测方法,通过Fc结构域结合并激活FcγRI,用于检测抗体和其他大分子药物的效能和稳定性。该检测包含一个基因工程化的 Jurkat T细胞系,该细胞系表达高亲和力的人的FcγRI和一个萤光素酶报告基因。生物活性检测的工作流程简单、稳定,且可产生一致性良好的检测结果,同时克服了传统检测方法的诸多局限。


细胞传代模式(目录号:GA1332)


  • 包括FcγRI效应细胞(CPM);这些细胞为冻存细胞,其可以进行复苏,传代或保存以供长期使用。
  • 可与Bio-Glo™萤光素酶检测系统配合使用。


细胞库形式(目录号:GA1330)


  • 适用于计划扩充CPM的用户,但扩充由普洛麦格科学家完成。



实验流程



检测原理


FcγRI Effector Reporter Bioassays使用了一种替代传统的基于原代细胞检测的读数法。由稳定表达人FcγRI和反应元件(RE)介导萤光素酶活性激活的Jurkat细胞系(效应细胞)代替原代细胞。




图1:FcγRI ADCP Reporter Bioassay检测原理图示。该生物活性检测包括一个基因工程化的细胞系(FcγRI效应细胞),表达抗原的靶细胞和抗原特异性抗体。当所有的组分共培养时,抗体会同时结合到靶细胞抗原和效应细胞表面的FcγRI受体

上。结果导致受体聚集,细胞内信号传递以及萤光素酶活性产生。


数据展示





FcγRI ADCP Reporter的代表性数据。图A. 在Raji靶细胞存在的情况下,用连续稀释的对照抗体、anti-CD20和英夫利西单抗(infliximab, anti-TNFα)处理FcγRI ADCPBioassay效应细胞。图B. 在Raji靶细胞存在或不存在的情况下,用连续稀释的对照抗体和anti-CD20处理FcγRI ADCPBioassay效应细胞。实验数据由Thaw-and-use细胞生成。使用Bio-Glo™试剂定量测定萤光素酶活性,并在GloMax® Discover System上进行读数。使用GraphPad Prism®软件将获得的数据拟合为4参数逻辑曲线。

产品名称 规格 目录号 目录价 促销价 备注
购买产品

组分列表


储存温度

相关资源

  • 常见问题
  • 视频
  • 产品相关资料
  • 相关产品