IL-2Rβγ Bioassay

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评估旨在针对中间亲和力IL-2Rβγ受体的细胞因子生物制品的作用机制(MOA)


  • 缺乏CD25表达
  • 根据ICH指南进行预认证
  • 96孔和384孔板模式
  • 无需原代细胞培养
  • 提供细胞增殖模型(CPM)模式

方便的IL-2Rβγ生物活性测定 ,一致性良好的结果


IL-2受体(IL-2R)是1型细胞因子受体,由三个亚基组成:IL-2Rα(CD25)、IL-2/IL-15Rβ(CD122)和IL-2Rγ(CD132)。高亲和力三聚体受体形式由这三个亚基组成,其存在于调节性T细胞(Treg)、活化的CD4和CD8效应T细胞、某些自然杀伤(NK)细胞,以及各种内皮细胞类型。而中等亲和力异二聚体受体形式,仅包含IL-2Rβ和IL-2Rγ,存在于CD8+效应记忆T细胞和大多数NK细胞上。IL-2Rγ也被称为γ共同链(γc)并且在IL-4、IL-7、IL-9、IL-15和IL-21的受体中存在。

高剂量重组IL-2疗法可以促进免疫抑制性Treg细胞的扩增和发展,这在肿瘤微环境中通常被认为是不利的。与IL-2不同,IL-15是一种功能性相关的细胞因子,它对Treg细胞没有影响。为了避免高剂量IL-2的陷阱,正在开发其他IL-2和IL-15分子,这些分子针对中等亲和力受体和表达它的细胞类型,可能产生更安全、更特异的治疗反应。

IL-2Rβγ Bioassay是一种基于细胞的生物发光活性检测,用来测定人类IL-2Rβγ受体的刺激或抑制。该方法克服了当前无法区分通过高亲和力和中等亲和力IL-2受体的信号传导的局限性。这些细胞可用于开发旨在优先针对中等亲和力异二聚体受体的生物疗法。


Bioassay组分和产品形式:

IL-2Rβγ Bioassay以细胞增殖模型(CPM)(产品目录号J3392)和细胞库形式(产品目录号GA1410)提供,这些细胞以冷冻保存的形式提供,可以解冻并培养供长期使用。


检测原理

IL-2Rβγ Bioassay是一种基于细胞的生物发光检测法,用于测定人类IL-2Rβγ受体的刺激或抑制。



IL-2Rβγ Bioassay原理示意图。IL-2Rβγ Bioassay包括一个基因工程细胞系,即IL-2Rβγ Bioassay细胞。当IL-2或IL-15与中亲和力CD122/CD132异二聚体受体复合物(IL-2Rβγ)结合时,受体介导的信号会诱导发光,在添加Bio-Glo-NL™试剂后可以检测到这种发光,并且可以使用发光计对其进行定量。在细胞因子不存在的情况下,CD122/CD132复合物下游不会发生信号传递,也不会产生发光信号。


代表性数据

准确性和精确度对于生物活性检测和大分子药物的开发至关重要。IL-2Rβγ Bioassay既具有准确性又能保证精确度。准确性是衡量结果与目标或参考值接近程度的指标。精确度是衡量可重复性的指标。IL-2Rβγ Bioassay是根据ICH指南开发的,并进行了预验证,以满足用于抗体药物发现研究和开发的生物活性检测的性能特征。


  • 准确性:衡量结果接近参考或“目标”值的能力。
  • 实验室内精确度:衡量在相同操作条件下,对同一均质样本进行多次测定时的重复性(同一分析员;同一实验室;同一天)。
  • 中间精确度:衡量不同分析员、设备或在不同日期对同一均质样本进行多次测定的重复性。
  • 线性:衡量您的测定方法能够提供与样本浓度成比例的测量值的能力。



IL-2Rβγ Bioassay展示了良好的精确度、准确性和线性





IL-2Rβγ Bioassay的代表性数据。按照操作指南描述,准备IL-2Rβγ Bioassay细胞,并将其与重组IL-2和IL-15的系列稀释液一起孵育。在6小时的孵育后,加入Bio-Glo-NL™试剂,并使用GloMax® Discover System检测发光。使用GraphPad Prism®软件将数据拟合到4PL曲线。IL-2的EC50为81ng/ml(图A),诱导倍数约为24(图B)。IL-15的EC50为4.4ng/ml,诱导倍数约为28。数据是通过使用培养细胞生成的。图A显示了原始发光测量值。图B显示了计算出的诱导倍数。


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