可扩展的试剂盒用于检测标签蛋白质的蛋白质相互作用

Lumit^®抗标签蛋白相互作用试剂使研究人员能够在均质（无洗涤）检测模式下，检测标签蛋白质的蛋白质-蛋白质或蛋白质-小分子相互作用。

该检测结合了免疫检测技术和NanoLuc^®二亚单元系统（NanoBiT）。NanoBiT是一种结构互补性报告基因，非常适合进行相互作用研究。NanoBiT^®系统由两个亚基组成：大亚基（LgBiT；18kDa）和小亚基（SmBiT；11个氨基酸肽）。这两个亚基可以作为重组融合蛋白表达，或通过化学方法偶联到抗体或其他感兴趣的靶标蛋白上。LgBiT和SmBiT两个亚基经过优化，具有最佳的稳定性和极低限度的自我聚合，这是由于它们较弱的亲和力（Kd = 190μM）。当LgBiT和SmBiT被抗标签抗体带到彼此接近时，会相互结合形成具有活性的酶并在底物存在的条件下产生明亮的发光信号。

 Lumit^®免疫检测工作流程

在Lumit^®抗标签检测系统中，链霉亲和素及抗6His、GST、DYKDDDDK（FLAG^®标签）和人-Fc的抗体被标记上了LgBiT或SmBiT。当两个带有不同标签的蛋白质相互作用时，利用相应的SmBiT和LgBiT标记试剂即可检测到这种相互作用。

检测依赖GTP的KRAS-cRAF相互作用

KRAS与下游效应分子cRAF的相互作用发生在其结合GTP或不可水解类似物GppNHp时。	Lumit®蛋白-蛋白相互作用(PPI)检测系统足够灵敏，能够检测GTP结合状态下微小的变化。

监测基于VHL的三元复合物形成

比较不同PROTACs针对目标蛋白的效力。了解更多关于我们检测三元复合物形成的解决方案。

Lumit^® Anti-Tag PPI试剂应用说明（Application notes）：

• 使用小分子抑制剂调节KRAS-c-RAF相互作用
• 监测蛋白激酶与小分子抑制剂之间的相互作用
• 监测Cbl-b的自泛素化
• 利用PROTACs监测三元复合物的形成