Q:Promega有哪些cAMP检测方法,如何选择?
回答:
cAMP-Glo™ Assay 与 cAMP-Glo™ Max Assay:
cAMP-Glo™ Assay 是一种均质的、利用生物发光原理检测细胞内cAMP水平变化的高通量方法。这种检测方法的原理是:细胞中cAMP 促进试剂中蛋白激酶 A (PKA)全酶的活性,降低试剂中ATP含量,从而引起偶联的萤光素酶(luciferase) 反应光信号降低。 cAMP-Glo™ Assay 可在 96 孔、384 孔和 1536 孔培养板中进行。培养板放置于微孔板发光检测仪中读取数据。利用cAMP 标准曲线,发光值和 cAMP 的浓度变化相关联。cAMP-Glo™ Max Assay 与前者原理一致,区别是将裂解缓冲液与cAMP 反应缓冲液合二为一,成为cAMP-Glo™ ONE Buffer。这种新的规格简化了实验操作过程,减少了完成检测所需的时间。相关应用请查阅链接文章:
GloSensor™ cAMP Assay:
GloSensor™ cAMP Assay 是利用报告基因检测方法测定细胞内 cAMP 的水平变化。该技术将萤火虫萤光素酶经过遗传改造,插入了一段可结合 cAMP 的蛋白组分,只有当结合上 cAMP 后,萤光素酶构象发生改变,才导致光输出的增加。这种活细胞检测在利用 cAMP 进行信号转导动力学和调控等研究方面表现出众。 将目的受体和该生物传感器在选定的细胞系中进行瞬时表达时,研究者可使用 GloSensor™ cAMP 检测试剂盒进行检测。操作过程很简单:用 GloSensor™ cAMP Reagent (GloSensor™ cAMP 试剂 ) 预平衡细胞大约 2 小时;然后用特定的激动剂 / 拮抗剂或者未知活性的化合物处理细胞, 10-30 分钟后检测发光。用带有自动进样器的发光检测仪进行有效检测,比如 GloMax® 系列发光检测仪。 GloSensor™ cAMP 试剂要求在 GloSensor™ Limited Use Label License (GloSensor™ 有限使用标签许可证书 ) 指导下使用。相关应用请查阅:
cAMP-Glo™ Assay 与 cAMP-Glo™ Max Assay:
cAMP-Glo™ Assay 是一种均质的、利用生物发光原理检测细胞内cAMP水平变化的高通量方法。这种检测方法的原理是:细胞中cAMP 促进试剂中蛋白激酶 A (PKA)全酶的活性,降低试剂中ATP含量,从而引起偶联的萤光素酶(luciferase) 反应光信号降低。 cAMP-Glo™ Assay 可在 96 孔、384 孔和 1536 孔培养板中进行。培养板放置于微孔板发光检测仪中读取数据。利用cAMP 标准曲线,发光值和 cAMP 的浓度变化相关联。cAMP-Glo™ Max Assay 与前者原理一致,区别是将裂解缓冲液与cAMP 反应缓冲液合二为一,成为cAMP-Glo™ ONE Buffer。这种新的规格简化了实验操作过程,减少了完成检测所需的时间。相关应用请查阅链接文章:
- https://www.promega.com.cn/resources/pubhub/measuring-camp-levels-and-cytotoxicity-in-a-single-plate-well-article/
- Monitoring the Activity of GPCR Modulated by Lipid or Free Fatty Acid Agonists
- Monitor GPCR Modulation of Cellular cAMP with an HTS Bioluminescence-Based Assay
GloSensor™ cAMP Assay:
GloSensor™ cAMP Assay 是利用报告基因检测方法测定细胞内 cAMP 的水平变化。该技术将萤火虫萤光素酶经过遗传改造,插入了一段可结合 cAMP 的蛋白组分,只有当结合上 cAMP 后,萤光素酶构象发生改变,才导致光输出的增加。这种活细胞检测在利用 cAMP 进行信号转导动力学和调控等研究方面表现出众。 将目的受体和该生物传感器在选定的细胞系中进行瞬时表达时,研究者可使用 GloSensor™ cAMP 检测试剂盒进行检测。操作过程很简单:用 GloSensor™ cAMP Reagent (GloSensor™ cAMP 试剂 ) 预平衡细胞大约 2 小时;然后用特定的激动剂 / 拮抗剂或者未知活性的化合物处理细胞, 10-30 分钟后检测发光。用带有自动进样器的发光检测仪进行有效检测,比如 GloMax® 系列发光检测仪。 GloSensor™ cAMP 试剂要求在 GloSensor™ Limited Use Label License (GloSensor™ 有限使用标签许可证书 ) 指导下使用。相关应用请查阅: