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Q:pGL4载体名称注释

pGL4系列的载体种类非常丰富,为使用者提供了更多的选择,但也有更多的选择困难。其实,一个载体的名称,就可以帮助我们很好的了解它的特点。

 

通常一个载体上主要有三个可能发生变化的功能区域,从上游到下游依次为:

l  上游调控区:可能包含minPTATA box),response element+minPpromoterMCSmultiple cloning region

l  报告基因编码区:可能包含编码萤火虫萤光素酶报告基因的luc2/luc2p/luc2CP,和编码海肾萤光素酶报告基因的hRluc/hRlucP/hRlucCP

l  哺乳动物细胞稳定转染标记基因Hygromycin (Hygro or Hygr)Neomycin (Neo or Neor) 或者Puromycin (Puro or Puror)

 

载体的名称基本结构是:

 

载体编号 [ 报告基因种类 / 上游调控区关键元件 / 稳转筛选标记 ]

 

例:  pGL4.32  [   luc2P     /      NF-κB-RE    /    Hygro    ]   

 

 

l  所有载体上都标示报告基因种类,其他元素只标示有特殊功能的;

l  如果上游调控区没有特殊的调控元件,只包含多克隆位点区;同时不包含筛选标记基因,则只标示编码基因种类,例如pGL4.10[luc2]pGL4.70[hRluc]

l  如果上游调控区有启动子,但载体不带有筛选标记,则只添加启动子种类,例如pGL4.23[luc2/minP]pGL4.13[luc2/SV40]

l  如果上游没有特殊调控元件,但载体带有筛选标记,则只添加具体筛选标记基因名称,例如pGL4.17[luc2/Neo]pGL4.14[luc2/Hygro]

l  所有的带有特殊信号通路反应元件的载体,反应元件下游都有minP,但只标示信号通路反应元件名称,不再特别标明minP,例如pGL4.32[luc2P/NF-κB-RE/Hygro]

l  所有带有组成型表达启动子(CMV/SV40/TK等)的载体,上游调控区都不再有多克隆位点区(MCS),例如pGL4.13[luc2/SV40], pGL4.50[luc2/CMV/Hygro]

 

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