Q:pGL4载体名称注释
pGL4系列的载体种类非常丰富,为使用者提供了更多的选择,但也有更多的选择困难。其实,一个载体的名称,就可以帮助我们很好的了解它的特点。
通常一个载体上主要有三个可能发生变化的功能区域,从上游到下游依次为:
l 上游调控区:可能包含minP(TATA box),response element+minP,promoter,MCS(multiple cloning region)
l 报告基因编码区:可能包含编码萤火虫萤光素酶报告基因的luc2/luc2p/luc2CP,和编码海肾萤光素酶报告基因的hRluc/hRlucP/hRlucCP
l 哺乳动物细胞稳定转染标记基因:Hygromycin (Hygro or Hygr),Neomycin (Neo or Neor) 或者Puromycin (Puro or Puror)
载体的名称基本结构是:
载体编号 [ 报告基因种类 / 上游调控区关键元件 / 稳转筛选标记 ]
例: pGL4.32 [ luc2P / NF-κB-RE / Hygro ]
l 所有载体上都标示报告基因种类,其他元素只标示有特殊功能的;
l 如果上游调控区没有特殊的调控元件,只包含多克隆位点区;同时不包含筛选标记基因,则只标示编码基因种类,例如pGL4.10[luc2],pGL4.70[hRluc];
l 如果上游调控区有启动子,但载体不带有筛选标记,则只添加启动子种类,例如pGL4.23[luc2/minP],pGL4.13[luc2/SV40];
l 如果上游没有特殊调控元件,但载体带有筛选标记,则只添加具体筛选标记基因名称,例如pGL4.17[luc2/Neo],pGL4.14[luc2/Hygro];
l 所有的带有特殊信号通路反应元件的载体,反应元件下游都有minP,但只标示信号通路反应元件名称,不再特别标明minP,例如pGL4.32[luc2P/NF-κB-RE/Hygro];
l 所有带有组成型表达启动子(CMV/SV40/TK等)的载体,上游调控区都不再有多克隆位点区(MCS),例如pGL4.13[luc2/SV40], pGL4.50[luc2/CMV/Hygro]。