Q:做siRNA研究推荐的载体，psiCHECK-2与pmirGLO的区别？
pmirGLO Dual-Luciferase miRNA Target Expression Vector (E1330) 是为miRNA靶标研究而设计的载体，可通过将 miRNA 的靶序列插入到主报告基因萤火虫萤光素酶基因（luc2）的下游或者 3' 端而实现。萤火虫萤光素酶表达的下降意味着内源性的或外源引入的 miRNA 与克隆的 miRNA 的靶序列发生了结合。这一载体是基于 Promega 的双报告基因技术，萤火虫萤光素酶基因（luc2）作为主报告基因，用于监控 miRNA 的调节，海肾萤光素酶基因（hRluc-neo）作为内参报告基因，用于进行归一化处理和稳定转染的筛选标记。
与psiCHECK™ -2 载体相比有以下特点/优点：pmirGLO载体主报告基因所带的启动子PGK为中等强度的启动子；载体上带有Neo抗性基因，可作为稳定转染筛选标记；主报告基因为萤火虫萤光素酶基因，更符合大部分人的使用习惯。
psiCHECK™-2 Vector (C8021) 最初是为验证siRNA靶标设计的。该载体用海肾萤光素酶（hRluc）作为主报告基因；萤火虫萤光素酶（hluc+）则作为内参 报告基因，用于进行归一化处理。目的基因被克隆至海肾萤光素酶翻译终止密码子下游的多克隆位点。由合成的 siRNA 或体内表达的 shRNA 引发的针对目的基因的 RNAi过程，导致 融合 mRNA 的剪切和随后的降解。也有文章中用psiCHECK-2进行miRNA研究。但与pmirGLO载体相比，有以下两个缺憾：1.酶切位点少；2. SV40启动子活性高，用于 调节效果明显的siRNA可行，而当miRNA抑制作用比较弱时，不容易观察到明显的变化。由于miRNA的调节作用通常是微量调节，使用中等强度启动子驱动报告基因表达的载体（如pmirGLO载体）通常更合适一些。
