Q:进行小动物活体成像时,使用生物发光法和荧光法的区别和优缺点是什么?
|
生物发光法 |
荧光法 |
光信号产生原理 |
由萤光素酶催化底物,通过化学反应产生发光信号 |
荧光分子吸收来自激发光的能量,部分能量以光的形式释放产生荧光 |
仪器要求 |
信号较弱,需要更灵敏的CCD镜头;无需激发 |
需要不同波长的激发光;检测需要特定波长的滤光片 |
操作 |
需要向动物体内注射萤光素酶底物 |
无需注射底物 |
标记选择 |
萤光素酶选择种类相对局限 |
有多种荧光蛋白和荧光染料可选 |
信噪比 |
哺乳动物体内无内源自发光,背景极低,信噪比更高 |
动物组织存在非特异性的自发荧光,背景高,信噪比低,检测灵敏度受限 |
灵敏度 |
灵敏度高;可检测体内低至102水平的细胞 |
灵敏度低;体内检测至少需要105水平的细胞 |