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Q:进行小动物活体成像时,使用生物发光法和荧光法的区别和优缺点是什么?

小动物活体成像是进行肿瘤学研究、干细胞研究、病毒学研究等领域的有力工具,常用的方法包括利用萤光素酶作为报告基因的生物发光法活体成像,和利用荧光蛋白及各种荧光染料的荧光法活体成像。这两类方法的区别和优缺点的比较如下表:

生物发光法

荧光法

光信号产生原理

由萤光素酶催化底物,通过化学反应产生发光信号

荧光分子吸收来自激发光的能量,部分能量以光的形式释放产生荧光

仪器要求

信号较弱,需要更灵敏的CCD镜头;无需激发

需要不同波长的激发光;检测需要特定波长的滤光片

操作

需要向动物体内注射萤光素酶底物

无需注射底物

标记选择

萤光素酶选择种类相对局限

有多种荧光蛋白和荧光染料可选

信噪比

哺乳动物体内无内源自发光,背景极低,信噪比更高

动物组织存在非特异性的自发荧光,背景高,信噪比低,检测灵敏度受限

灵敏度

灵敏度高;可检测体内低至102水平的细胞

灵敏度低;体内检测至少需要105水平的细胞


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