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Q:无细胞表达系统的产物是纯蛋白吗?是否需要进行蛋白纯化?

无细胞表达系统是基于不同类型细胞裂解物制备的,体系中包含细胞裂解物当中大量的内源蛋白,因此在无细胞表达系统中新合成的蛋白是存在于蛋白混合物中的,并非纯蛋白。

如果下游应用需要使用纯化的蛋白,则需要进行蛋白纯化,可以选择在表达蛋白时带上合适的标签,通过标签进行蛋白纯化。如果下游应用是做蛋白相互作用研究,如免疫共沉淀、GST pull-down等,或是某些蛋白活性的检测,则无需纯化,直接进行下游实验即可。

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