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Q:使用无细胞表达系统有哪些注意事项？

使用无细胞蛋白表达系统的一般注意事项：

1. 使用无核酸酶的耗材，注意无RNase操作；
2. 使用去内毒素的质粒，并提高质粒的浓度，降低加入质粒的体积，以减少引入其他反应抑制因子；
3. 加入质粒模板要适量，不是越多越好；
4. 每次试验要做对照（阴性对照、阳性对照）；
5. 操作试剂要轻柔；
6. 禁止反复冻融试剂（干冰运输），使用时第一次解冻后将裂解物/提取物按单次用量分装，不要冻融超过两次；
7. 建议用Western Blot或标记的方法检测；
8. 电泳上样量：1-2μl无细胞表达产物。

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