如何检测氧化应激和细胞死亡
How to Measure Oxidative Stress and Cell Death
氧化应激是NAFLD进展的重要贡献者。肝脏脂肪变性导致线粒体功能障碍、内质网应激和脂肪毒性,所有这些都有助于过量活性氧(ROS)的产生。ROS的积累是有害的,可导致细胞损伤、死亡和肝纤维化。过度的ROS积累最终会导致细胞死亡,这是NAFLD/NASH发病的另一个关键过程。ROS-Glo™ H2O2 Assay可以用来检测细胞中的氧化应激水平。它使用高灵敏度的生物发光发,无需清洗可以快速检测H2O2。
我们通过使用ROS-Glo™和CellTox™Cytotoxicity Assay对HepG2细胞中氧化应激和细胞死亡进行多重检测。
HepG2 细胞用产生 ROS 的化合物 ( 甲萘醌 或邻苯三酚 ) 或细胞毒性诱导试剂 ( 洋地黄皂苷 ) 处理,37℃孵育 2 小时。细胞毒性检测试剂 CellTox™ Green 染料和 H2O2 底物在给药的时候添 加。 CellTox™ Green 染料孵育后测定荧光。然后加入 ROS-Glo™ 检测液,孵育 20 分钟后,测定发光信号。