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TPD破解不可成药靶点
课程概要
- TPD概述；
- TPD目前研究进展；
- TPD研究中的解决方案和case study
讲座主要相关产品
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NanoBRET®TE Intracellular E3 Ligase Assays
定量化合物对活细胞中的CRBN或VHL E3泛素连接酶的细胞内亲和力
执行简单的工作流程即可计算化合物的细胞内利用度（通透性的度量），帮助确定化合物的优先级
检测体系可放大或缩小；只需“添加”步骤即可完成操作
通过小分子（例如PROTAC或分子胶）降解蛋白质的过程需要多个步骤。初始步骤涉及小分子降解剂化合物进入细胞，然后与E3泛素连接酶和蛋白质靶标结合。 NanoBRET®TE Intracellular E3 Ligase Assays既可定量细胞内的靶标结合，又可测定细胞内降解剂化合物的利用度（availability）N2910, N2911, N2912, N2930, N2931, N2932 -
NanoBRET® VHL and CRBN Ternary Complex Starter Kits
基于BRET的活细胞测定，用于检测化合物诱导的E3连接酶三元复合物的形成
检测目标蛋白与E3连接酶组分VHL或CRBN在降解剂处理下的诱导相互作用
同时监测降解剂存在下的目标蛋白水平
进行三元复合物形成的终点或活细胞动力学分析ND2720, ND2700 -
NanoBRET® Ubiquitination Starter Kit
基于BRET的活细胞测定，用于检测蛋白泛素化
通用型泛素化测定，用于检测目标蛋白泛素化相对水平的变化
进行终点或活细胞动力学分析以确定蛋白泛素化动态
检测异位或内源性表达蛋白的泛素化ND2690 -
NanoBRET® Proteasomal Recruitment Starter Kit
基于BRET的活细胞检测，用于测定蛋白向26S蛋白酶体的募集
检测目标蛋白向蛋白酶体的募集
进行蛋白酶体转运的终点或活细胞动力学分析
检测异位或内源性表达蛋白的蛋白酶体募集ND2730 -
HaloTag® Ubiquitin Proteasome System Fusion Vectors
NanoBRET®泛素蛋白酶体系统相互作用检测的融合载体
检测目标蛋白与E3连接酶组分VHL或CRBN在降解剂处理下的诱导相互作用
检测目标蛋白的泛素化
检测目标蛋白向蛋白酶体的募集N2691, N2701, N2721, N2731, N1691 -
Nano-Glo® Live Cell Assay System
在活细胞中检测NanoLuc®发光信号
底物和缓冲液经过优化，可提高试剂稳定性
用于检测 NanoBiT® 蛋白互补或 NanoLuc® 报告基因活性
可在单个时间点或连续长达 2 小时的时间内监测发光，而不会影响细胞活力N2011, N2012, N2013 -
Nano-Glo® HiBiT Lytic Detection System
准确定量细胞中表达的任何HiBiT标记蛋白
灵敏的生物发光蛋白检测
简单的添加-读取检测——无需抗体
定量超过7个数量级的线性动态范围N3030, N3040, N3050 -
Nano-Glo® HiBiT Extracellular Detection System
定量细胞表面表达的HiBiT标记蛋白
特异性检测活细胞的细胞外表达蛋白或分泌蛋白
简单的添加-混合-读取检测模式——无需抗体
定量超过7个数量级的线性动态范围N2420, N2421, N2422 -
Nano-Glo® HiBiT Blotting System
快速发光法蛋白印迹检测
在印迹膜上确定蛋白分子量和定量蛋白表达
整个检测操作仅需要几分钟，操作步骤极少
灵敏度达到飞克级，在五个数量级内成正比N2410 -
Nano-Glo Extended Live Cell Substrates
可在数小时或数天内对 NanoLuc® 或 NanoBiT® 报告基因活性进行活细胞检测
增强的信号稳定性，可对报告基因活性进行更长时间的实时动力学分析
通过测量同一样本在一段时间内的反应，简化时间进程研究
可灵敏地检测内源水平的蛋白质--无需过表达N2570, N2571, N2572, N2580, N2581, N2582, N2590 -
ViaScript™ mRNA Transfection Reagent
ViaScript™ mRNA转染试剂
细胞群体中的均匀表达
通过可调节式的表达来优化测定窗口
在难转染细胞系中具有高转染效率NE1100, EV4961, EV4965 -
FuGENE® 4K Transfection Reagent
最高效的广谱DNA转染试剂
在具挑战性的和常规的细胞系中进行高效转染
温和的试剂将对细胞活力的影响降至最低
蛋白质和病毒生成的理想选择E5911, E5912 -
FuGENE® HD Transfection Reagent
更好地转染具有挑战性的细胞系
用于难以转染的细胞系
用于原代细胞的转染
用于蛋白质和病毒生产E2311, E2312 -
ViaScript™ LgBiT mRNA Delivery System
改善的HiBiT标记蛋白的活细胞动力学分析
在细胞群中高效且均匀表达
比DNA质粒更快的表达速度，更快获得结果NE1120, NE1130, NE1140 -
NanoBRET®TE E3 Ligase Vectors
用于NanoBRET® TE E3 Ligase Assays的 NanoLuc® E3 连接酶融合蛋白表达载体和 DDB1 表达载体
可用于表达与 E3 连接酶 CRBN 或 VHL 蛋白融合的 NanoLuc® 萤光素酶的转染载体
表达 DDB1 蛋白的转染级别载体
将这些载体与 NanoBRET® TE Intracellular E3 Ligase Assays,（CRBN 或 VHL）一起使用，检测 E3 连接酶的靶点相互作用N2741, N2751, N2761 -
LgBiT Expression Vector and Stable Cell Line
表达细胞内LgBiT蛋白用于HiBiT分析
进行HiBiT标记蛋白的活细胞动力学分析，无需细胞裂解
兼容外源性或内源性表达的HiBiT融合蛋白
使用补充的HiBiT作为活细胞NanoBRET®应用的能量供体N2672, N2681 -
Intracellular TE Nano-Glo® Substrate/Inhibitor
用于NanoBRET® Target Engagement (TE) Assays 检测
试剂中 NanoLuc® substrates 的量足够在特定时间段内产生 BRET 检测所需的明亮的供体发光信号
Extracellular NanoLuc® inhibitor （细胞外NanoLuc® 抑制剂）是一种不能透过细胞膜的分子，可以用于抑制细胞外环境的任何 NanoLuc® 信号
适用于做终点法检测或 2 小时以内的动力学检测。Nano-Glo® Vivazine® Substrate 半衰期更长，适合检测时间超过 2 小时以上的操作方案N2162, N2160, N2161 -
Anti-HiBiT Monoclonal Antibody
基于抗体的灵敏的HiBiT标记蛋白检测
用正交法验证生物发光结果
在CRISPR/Cas9 HiBiT敲入后，在细胞池或克隆中确认内源性HiBiT标记蛋白的亚细胞定位
使用经典的Western blot检测确定蛋白水平和大小
对HiBiT标记蛋白进行免疫沉淀
对活细胞(细胞外HiBiT)或固定细胞(细胞内HiBiT)进行FACS分析N7200, N7210 -
Lumit® Immunoassay Lysis and Detection Kits and Secondary Antibodies
Lumit® Immunoassay Cellular Systems的可单独购买组分
包含新的Lumit® Lysis Buffer II！提供了在广泛的细胞靶标范围内增强的性能
Lumit® Immunoassay Lysis and Detection Kit 中包含的试剂是Lumit® Immunoassay Cellular Systems的一部分，该试剂盒将与特定的Lumit®二抗对配合使用
不能将一对来自同一物种的一抗一起使用
灵敏的、基于溶液的免疫检测——无需洗涤步骤，无需固定到板子、磁珠或其他物质表面W1231, W1232, W1233, W1061, W1062, W1071, W1072, W1021, W1022, W1051, W1052, W1041, W1042, W1031, W1032 -
Lumit® Immunoassay Cellular Systems
用于细胞分析物的免洗型微孔板免疫分析法
包含新的Lumit® Lysis Buffer II！针对广泛的细胞靶标提供增强的性能
新的应用说明（Application notes）可用于更多经过验证的靶标
Set 1: Lumit™ Anti-Mouse Ab-LgBiT/Lumit™ Anti-Rabbit Ab-SmBiT
Set 2: Lumit™ Anti-Mouse Ab-SmBiT/Lumit™ Anti-Rabbit Ab-LgBiT
Starter Kit:包括 Set 1 & Set 2 全部4个Lumit™ 二抗抗体；一抗由用户提供W1201, W1202, W1203, W1331, W1332, W1333, W1220 -
Lumit® Anti-Tag Protein Interaction Reagents
基于溶液的方法检测含标签蛋白的蛋白质相互作用
在30-120分钟内快速且灵敏地检测蛋白质相互作用
无需洗涤、转移或固定步骤
试剂包括与Lumit® LgBiT和SmBiT偶联的抗标签抗体（及链霉亲和素），标签包括6His、GST、DYKDDDDK（FLAG®）、人IgG和生物素
提供对应的应用说明指导
这些试剂与Lumit® Detection Reagent A配套使用W1600, W1640, W1620, W1660, W1601, W1611, W1641, W1651, W1621, W1631, W1661, W1671, CS332214, CS332222, CS332223 -
HaloPROTAC3
HaloTag® 融合蛋白的小分子降解剂
特异性和可控的蛋白质降解
使用HaloTag®荧光配基，通过FACS®分选技术对CRISPR/Cas9 HaloTag®编辑细胞进行特异性富集
通过将HiBiT标签添加到HaloTag®融合蛋白中，可以方便地进行蛋白降解的发光检测GA4110, GA3110
