活细胞非裂解型的 Nano-Glo^®Live Cell Assay System，由于受信号衰减影响必须在 2 小时以内完成检测。而 Nano-Glo^®Endurazine™ 和 Vivazine™ 活细胞底物为 NanoLuc^® 和 NanoBiT^®萤光素酶提供了活细胞检测的可选方案，其检测可持续数小时或数天。对于这两种底物，在整个实验中，酯水解的缓慢速率导致 furimazine的稳定释放，这个过程由细胞内酯酶催化。一旦形成 , furimazine 即可作为 NanoLuc^® 和 NanoBiT^® 萤光素酶的底物。

与 Endurazine™ 底物相比，Vivazine™ 底物光信号更强，但光信号衰减速度也更快。Endurazine™ 底物提供了最大的信号稳定性，但其初始信号强度较低。您需要评估两种底物来确定哪种信号强度和稳定性的组合最适合您的实验 [ 例如，Nano-Glo^® Extended Live Cell Substrate Trial Pack (Cat.#N2590)]。

选择最佳的信号强度和稳定性组合

Nano-Glo^® Endurazine™ 和 Vivazine™ 底物与 Nano-Glo^® 活细胞检测系统比较。将PGK 启动子启动的NanoLuc^® 萤光素酶载体瞬时转染到 HEK293 细胞中，使用不同的检测试剂检测长时间的发光信号变化。

长时程检测报告基因活性

比较 Nano-Glo^® Endurazine™ 和 Vivazine^® 72 小时的信号。将编码由 HSV-TK 启动子表达的 NanoLuc^® 萤光素酶的质粒瞬时转染到 HEK293 细胞中，并测量 72 小时内的发光信号强度。