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Lumit® FcγR Binding Immunoassays
Lumit® FcγR 结合免疫检测
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检测Fcγ受体结合
无需洗涤或转移,简单的添加-混合-读数
结果在1小时内即可获得
兼容高通量,可在96孔或384孔板中进行检测
产品名称 | 规格 | 目录号 | 目录价 | 促销价 |
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Lumit® FcγRI Binding Immunoassay | 100 assays | W7080 | 7721 | |
Lumit® FcγRI Binding Immunoassay 10X | 1000 assays | W7081 | 68098 | |
Lumit® FcγRIIa (H131) Binding Immunoassay | 100 assays | W7070 | 7721 | |
Lumit® FcγRIIa (H131) Binding Immunoassay 10X | 1000 assays | W7071 | 68098 | |
Lumit® FcγRIIa (R131) Binding Immunoassay | 100 assays | W7060 | 7721 | |
Lumit® FcγRIIa (R131) Binding Immunoassay 10X | 1000 assays | W7061 | 68098 | |
Lumit® FcγRIIIa (V158) Binding Immunoassay | 100 assays | W7050 | 7721 | |
Lumit® FcγRIIIa (V158) Binding Immunoassay 10X | 1000 assays | W7051 | 68098 | |
Lumit® FcγRIIIa (F158) Binding Immunoassay | 100 assays | W7040 | 7721 | |
Lumit® FcγRIIIa (F158) Binding Immunoassay 10X | 1000 assays | W7041 | 68098 | |
Lumit® FcγRIIb Binding Immunoassay | 100 assays | W7030 | 7721 | |
Lumit® FcγRIIb Binding Immunoassay 10X | 1000 assays | W7031 | 68098 |
W7080
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W7081
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W7070
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W7071
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W7060
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W7040
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W7041
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W7030
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W7031
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更快、更简单的Fc受体结合检测
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Lumit® FcγR结合免疫检测是一种新型均质的(无需洗涤)竞争性检测方法,用于测定人源Fc受体与抗体或Fc融合蛋白之间的相互作用。该检测基于NanoBiT®互补技术产生发光信号。检测中使用LgBiT标记的人源IgG(示踪剂-LgBiT)作为示踪分子,SmBiT标记的人源FcγR作为靶标。当样本中不存在抗体分析物时,示踪剂-LgBiT会与FcγR-SmBiT靶标结合,产生最大发光信号。在含分析物的样本中,未标记的IgG会与示踪剂-LgBiT竞争结合FcγR靶标,导致发光信号呈浓度依赖性降低。这些操作简便的生化检测可补充并提供正交数据,验证基于细胞的功能性生物测定结果。
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Fcγ受体功能
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IgG Fc受体(FcγRs)广泛表达于造血来源细胞,介导免疫系统保护功能。这类受体因其对抗体分子可结晶片段(Fc区)具有亲和力而得名。当与附着于病变细胞或病原体的抗体结合时,这些受体会介导抗体依赖性细胞毒性(ADCC)和抗体依赖性细胞吞噬作用(ADCP)等效应功能。不同Fcγ受体对IgG亚类的亲和力存在差异,且这些相互作用还会受到IgG糖基化模式的影响。
注:每盒试剂盒的总检测次数会根据最终孔体积而变化。
标准孔体积规格:
100次检测装:适用于96孔板100次检测或384孔板400次检测
1,000次检测装:适用于96孔板1,000次检测或384孔板4,000次检测
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原理及实验流程
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Lumit® FcγR Binding Immunoassays工作原理
在没有抗体分析物的情况下,Tracer-LgBiT会与FcγR-SmBiT靶标结合,从而产生最大发光信号。在含有分析物的样本中,未标记的IgG会与Tracer-LgBiT竞争结合FcγR靶标,导致发光信号出现浓度依赖性减弱。
简单的操作流程,结果具有可重复性
Lumit® FcγR Binding Immunoassays 是基于溶液的均质化检测方法,无需洗涤或样本转移步骤!
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检测性能数据
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抗hCD20不同亚型与高亲和力FcγRI的差异性结合(通过Lumit® FcγRI结合免疫检测法测定)。图示为抗hCD20的IgG1、IgG2、IgG3和IgG4与FcγRI相互作用的典型结合曲线(以归一化发光值表示)。无分析物时(0nM抗体)产生的最大生物发光信号定义为100%,各抗体浓度下的信号值以相对于该最大值的百分比表示。采用四参数逻辑回归模型(1/y²加权)拟合数据以确定IC₅₀值。
采用Lumit® FcγRIIIa (V158)结合免疫检测法测定的利妥昔单抗生物类似物结合特性。图中显示了对照抗CD20 IgG1、ublituximab和obinutuzumab的典型结合曲线(归一化发光值表示)。在无分析物条件下(0nM抗体)观察到的最大生物发光信号设定为100%,各抗体浓度下的信号值以相对于该最大值的百分比呈现。通过四参数逻辑回归模型(1/y²加权)拟合数据,计算表观IC₅₀值。
过氧化氢介导的氧化作用对人源IgG3与FcγRIIa (H131)结合的影响(通过Lumit® FcγRIIa结合免疫分析法测定)。将人源IgG3加入过氧化氢溶液,使其终浓度分别为3%、1%、0.3%或0%(对照组)。样品在室温下处理2小时后去除残留H₂O₂。检测各处理抗体的梯度稀释样本,并以原始发光值(RLU)对应IgG3浓度绘制曲线。采用四参数逻辑回归模型(1/y²加权)拟合数据,计算表观IC₅₀值。
Fc糖链去除对FcγRI结合能力的影响(采用Lumit®FcγRI结合免疫检测法测定)。图示为天然人源IgG与经PNGase F去糖基化IgG的典型结合曲线。去糖基化处理条件:37℃过夜(IgG浓度4mg/ml;PNGase F用量为每20mg IgG添加1ml)。无分析物时(0nM IgG)获得的最大生物发光信号设定为100%,各IgG浓度下的信号值以相对于该最大值的百分比表示。采用四参数逻辑回归方程(1/y²加权)拟合数据,计算表观IC₅₀值。
Lumit®FcγRIIb结合免疫检测法检测结果。图中所示为FcγR对照抗体的标准曲线(数据经归一化处理)。归一化发光值的计算方法为:将无分析物时观测到的最大生物发光信号设为100%,含分析物时的信号值则表示为该最大值的百分比。采用四参数逻辑回归方程(1/y²加权)对数据进行拟合分析。
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Lumit® FcγR Binding Immunoassays-研究FcγR-Ab 相互作用的新型生物发光分析方法
大分子药物研发 | 产品简要介绍 |语言: 中文
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Fc受体功能分析与表征
大分子药物研发 | 技术介绍手册 |语言: 中文
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