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腺相关病毒（AAV）是基因治疗递送中常用的载体。AAV基因治疗的主要挑战之一就是开发有效的质量控制和质保方案，因为准确量化和表征AAV生产批次对于临床剂量的精准把控至关重要。目前的方案，如DNase处理和哺乳动物感染性测定，通常不够完善，可能导致批次间的高度变异性，从而因功能基因剂量的不准确测定而导致实验结果不理想。
Promega最新开发的TruTiter™ Reagent System能够在无需进行DNase 处理的情况下，通过dPCR 或qPCR 技术对病毒基因组进行一致性定量分析。
Application
产品应用
• AAV生产与工艺开发：在载体生产、纯化和质量控制（QC）的整个过程中实现精确的基因组滴定，以优化产量并确保批次一致性。
• 基因治疗剂量确定：为临床前和临床研究提供准确的病毒基因组定量，支持监管合规性和治疗效果。
• AAV血清型和工程化衣壳的比较分析：有助于表征不同AAV衣壳的稳定性和完整性，特别是那些在DNase工作流程中容易破裂的工程变体。
• 学术与转化研究：为研究AAV生物学、基因编辑和治疗性载体开发的研究人员提供快速、可靠的AAV定量。
• 未包装DNA的选择性抑制：消除假阳性结果，确保仅对完整的AAV基因组进行计数。
• 无需DNase处理，简单的工作流程： 减少处理时间、酶的变异性以及工作流程的复杂性。
• 与现有的PCR 病毒定量方案兼容：可以使用多种qPCR或数字PCR平台进行直接扩增。
• 直接从AAV样本中扩增：无需DNA纯化，节省时间并简化工作流程。
• 对工程改造AAV衣壳更精确的滴度测量：解决了DNase工作流程中衣壳破裂的问题。
• 经过验证的数据：与DNase-dPCR和感染性检测相比，性能相当或更优。
Principle
检测原理
TruTiter™ Reagent System采用一种新型分子(Viability PCR Reagent)，该分子无法穿透细胞膜，能够与任何暴露在外的核酸结合，从而阻止下游的扩增反应。这一特性使得在AAV 基因组滴定过程中无需进行DNase 处理步骤。
TruTiter™ Reagent与现有的PCR病毒定量方案兼容，可直接使用多种qPCR或数字PCR平台进行扩增。
Workflow
检测流程
TruTiter™Reagent System简单快速的检测流程：
与基于DNase的dPCR流程相比，TruTiter™ Reagent 可显著降低变异性。
01
TruTiter™ Reagent vs. DNase
上图：AAV2-NanoLuc® 病毒衣壳(1010 GU/ml)在65°C下处理10分钟。热处理后，AAV颗粒分别用DNase (红色) 或TruTiter™Reagent (绿色) 处理，并使用dPCR进行扩增，每种处理各进行8次技术重复。
上图：AAV2-NanoLuc® 病毒衣壳(1010GU/ml)用0.1% Tween®-20 处理10分钟。去污剂处理后，AAV颗粒分别用DNase (红色) 或TruTiter™Reagent (绿色) 处理，并使用dPCR进行扩增，每种处理各进行8次技术重复。
02
TruTiter™ Reagent vs. DNase vs. Mammalian Infectivity Assays
AAV2-NanoLuc® 病毒颗粒 (107 GU/ml) 在指定温度下处理10分钟。温度处理后，AAV颗粒分别用DNase (红色) 或TruTiter™ Reagent (绿色) 处理，随后进行dPCR检测。同时，使用HEK293细胞进行了24小时感染性测定 (蓝色)。为便于解读，数据以相比室温 (R.T.) 处理所获得信号的百分比表示。
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问题
使用Promega最新推出的TruTiter™ Reagent System进行AAV基因组滴度的准确测定，关于产品优势及特点描述错误的是：（单选）
1. 消除假阳性结果，确保仅对完整的AAV基因组进行计数
2. 与现有的PCR 病毒定量方案兼容，可以使用多种qPCR或数字PCR平台进行直接扩增
3. 直接从AAV样本中扩增，无需DNA纯化
4. 需要使用DNase处理以简化工作流程
5. 与DNase-dPCR和感染性检测相比，性能相当或更优
请在本次微信贴下方留言给出您的答案（回复序号即可，比如：1）。回答正确的第1、5、10、15、20、25、30、40、50、60位小伙伴可获得Lumie公仔一个！
留言截止时间：截止至2025年2月28日17：00
本次活动解释权归普洛麦格（北京）生物技术有限公司所有。
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关于Promega公司
Promega公司是为生命科学产业提供创新型解决方案和技术支持的领导者。公司拥有4,000多种产品组合，为细胞生物学、DNA、RNA和蛋白分析、药物开发、遗传鉴定和分子诊断等多个领域的生命科学工作提供支持。40多年来，这些工具和技术的应用领域不断拓展，如今已被实验室科学家和技术人员用于学术和政府研究、法医学应用、制药、临床诊断以及农业和环境监测等。Promega公司总部位于美国威斯康星州麦迪逊市，在16个国家设有分公司，在全球范围内还有50多个经销商。请访问www.promega.com，以了解更多信息。
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