培训班回顾
2021年9月9日，由Promega携手保诺-桑迪亚举办的“PROTAC药物研发技术培训班”已圆满落幕，本次会议我们特别邀请到了保诺-桑迪亚体外生物发现部，PROTAC 项目负责人国艳春博士，以及Promega高级应用专家- 吴金炜老师，为大家详细讲解了PROTAC药物研发技术解决方案及实战经验分享，受到了很多观众的好评！不过，错过直播的你也不用担心，回放及留言解答都为你备好啦！
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由于培训班直播现场时间有限，嘉宾未来得及一一解答大家的问题，因此我们将直播间剩余未解答的问题进行了整理，并请我们的技术专家做了详细解答。希望这部分内容能为大家的研究工作带来参考。
有时候会遇到这种情况，在做二元复合物形成的时候，Warhead有很好的结合，但是对应的PROTAC结合却很差，这是为什么，这样的话，做二元复合物形成还有意义吗？
答：检测二元复合物的意义在于1）早期筛选可以与POI结合的warhead及可以与E3结合的warhead；2）确定PROTAC与POI和E3的结合，如果二元都没有结合，更不用提三元了；3）了解PROTAC的透膜性，比如Promega NanoBRET target engagement assay的两种format (Live和permeabilized)，可以提供相关信息。
有没有用多肽做PROTAC药物？
答：有peptide-based PROTAC，以及antibody-based PROTAC (Ab-PROTAC)。
用HEK 293细胞外源性过表达NanoLuc评价蛋白降解的可行性与注意事项？
答：HEK293细胞中外源性过表达Nanoluc-POI融合蛋白可以评价靶蛋白的降解，瞬转形式比内源性表达相对来说前期操作简单，可更快拿到结果，但是信号窗口不如内源性表达的大。建议可以用过表达做PROTAC降解靶蛋白定性实验，使用带中等启动子（如TK、PGK）或弱启动子的Nanoluc载体，有需要也可以构建稳转细胞株。
是否可以protec用于免疫检查点，会比抗体阻断有什么优缺点？
答：用于免疫检查点的PROTAC已有报道，比如PD-L1。PROTAC可口服，可去除靶蛋白；抗体的serum half-life长，与靶蛋白的结合亲和力强，特异性强。
请问一下PROTAC技术使细胞内蛋白降解，
和mRNA药物比有什么优势？
答：RNA药物不能口服，不能系统给药，且制药难度高，潜在脱靶效应。
protac针对的靶蛋白需要有蛋白晶体结构吗？你们设计和构建的周期多久？
答：PROTAC的设计与构建，是化学和AI的领域，有蛋白晶体结构肯定是更利于设计的。
knock in效率有多高，是否有protocol？
答：Knock-in的效率与cell line, target, transfection efficiency有关。Promega 有提供相应的针对HiBiT knock-in的protocol。
以上答案仅供参考，如有任何问题请联系Promega！
Promega公司成立于1978年，总部设在美国威斯康星州麦迪逊市，在16个国家设有分公司，在全球范围内还有50 多家经销商，服务全球100多个国家。
Promega公司是为生命科学产业提供创新型解决方案和技术支持的领导者。公司拥有4,000多种产品，致力于提高全球范围内的科学家对基因组学、蛋白分析和表达、细胞分析、药物研发、分子诊断和遗传鉴定等领域的认知。
普洛麦格（北京）生物技术有限公司（Promega (Beijing) Biotech Co., Ltd）是Promega公司在中国大陆地区的分公司，于2005年成立。
今年是Promega第一个商品化萤光素酶报告基因及检测系统诞生30周年。几十年来，Promega在这个领域一直不断深耕，持续推出革新性的萤光素酶应用产品。
Promega产品不仅被生命科学研究者用于对生物学基本问题的理论研究，也被广泛用于应用科学领域，以帮助诊断、疾病治疗、发现新的治疗方法以及应用遗传和DNA测试进行人类遗传鉴定。
Promega在多个重要领域拥有重要的知识产权和许可，包括：
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生物发光，包括基因工程改造的萤光素酶、萤光素酶载体和底物
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短串联重复 (STR) 分析用于基于 STR 分析的细胞系鉴定、人类遗传鉴定、细胞和组织鉴定及混合样本检测
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HaloTag® 蛋白标记和捕获技术
保诺-桑迪亚，安宏资本旗下投资企业之一，是业内领先的合同研究、工艺开发和生产公司 (CRDMO)，专业为生物制药客户提供全面整合服务，支持药物发现、开发和生产（包括原料药和成品药）。作为全球第三大 CRDMO 公司，保诺-桑迪亚的 10大办事处遍布全球，旗下拥有 2000 多名员工，在中国和美国开展主要业务。
保诺-桑迪亚在大小分子发现、开发和放大方面拥有核心专业知识，支持 IND 申报，拥有独特的专利技术平台（例如不溶性化合物生物利用度增强平台 ）。公司总部位于美国圣地亚哥，在中国和美国均设有研发中心和生产基地。从原料药到药品，从发现到开发，从小分子到生物制剂，保诺-桑迪亚是您的合作伙伴，可加快您的项目并提高建立候选药物成功的效率。保诺-桑迪亚采用“一站式”运营模式，有效帮助生物制药客户加快发现进程并降低开发风险，从而创造更高价值的药物。
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