快速简便的生物发光细胞代谢检测法促进细胞治疗的发展
代谢特征是T细胞功能的关键决定因素,是有效CAR-T细胞治疗的宝贵信息。我们的生物发光细胞代谢检测试剂盒可用于检测 TCR 修饰或 CAR-T 工程化 T 细胞对代谢需求、氧化还原环境和营养可利用性的响应。这些基于孔板的高灵敏度度检测方法易于自动化,非常适合高通量样品分析。
CAR T适应性的代谢检测
T细胞代谢概述
01
生物发光法代谢物检测原理及流程概述
我们已经研发了一些生物发光检测方法来研究细胞进程和细胞反应。这些检测方法使用经过设计的萤光素酶萤光素前体底物,在有分析物存在时释放萤光素。
其中一项核心技术是NAD(P)H生物发光检测技术。通过加入选择性脱氢酶和NAD(P),可以检测代谢物。此外,在加入了选择性底物和NAD(P)的情况下,可以测定脱氢酶(DH)的活性。
其中部分产品原理有所不同,详情请查看每个产品页面。
02
细胞代谢检测产品及技术优势
技术优势包括:
● 操作简单:无需细胞收集和离心
● 多种样本:适用于多种样本类型,包括难裂解的 3D 样本类型
● 仪器兼容:无需特殊仪器,只需具有发光检测功能的多功能检测仪
● 高通量:基于多孔板的检测试剂盒,可拓展到 96/384/1536 孔板
● 高灵敏度:生物发光法,灵敏度显著高于吸光或荧光法,只需很少的起始细胞
我们提供下列细胞代谢检测系统:
点击图片查看产品详情
03
T细胞活化和扩增过程代谢物变化
在T细胞活化和扩增过程中,培养基代谢物如细胞增殖、乳酸、葡萄糖,谷胱甘肽等代谢物的变化不相同。
04
T细胞的胞内代谢物检测
初始T细胞、活化T细胞(效应细胞)和记忆样细胞的细胞内代谢物水平。收集细胞并用PBS进行清洗,以去除培养基中存在的任何代谢物。然后对T细胞进行裂解和中和,并分为三份进行各代谢物特异性检测(Glutamate-Glo™、BCAA-Glo™、Malate-Glo™)。
05
构建通路特异性T细胞代谢图谱
了解T细胞的代谢特征将有助于筛选最“适合”细胞治疗的细胞(即CAR T细胞)。
06
通过DH监测代谢途径
GAPDH和Gcl6p DH的脱氢酶活性(RLU/细胞)。原始细胞(蓝色)和第10天的效应细胞(红色)。
活化和扩增后的效应细胞显示出更强的糖酵解活性。
第14天具有GAPDH、Glc6PDH和LDH相应DH活性的“记忆样”细胞的T细胞滴定。第14天的细胞是记忆样T细胞和效应细胞的混合物。在细胞密度较低(<500个细胞)的情况下可检测到DH活性,因此可以对一个样品的多个DH进行分析。
关于Promega公司
Promega公司是为生命科学产业提供创新型解决方案和技术支持的领导者。公司拥有4,000多种产品组合,为细胞生物学、DNA、RNA和蛋白分析、药物开发、遗传鉴定和分子诊断等多个领域的生命科学工作提供支持。40多年来,这些工具和技术的应用领域不断拓展,如今已被实验室科学家和技术人员用于学术和政府研究、法医学应用、制药、临床诊断以及农业和环境监测等。Promega公司总部位于美国威斯康星州麦迪逊市,在16个国家设有分公司,在全球范围内还有50多个经销商。请访问www.promega.com,以了解更多信息。
产品信息
说明书查询
实验工具
技术资料