细胞膜损伤LDH释放检测应用文献:
Science:“战士”GBP蛋白家族的工作原理
LDH释放经常会被用于检测药物或者其他形式导致的细胞毒性,LDH释放可以作为判断细胞膜完整性的重要指标。
耶鲁大学 MacMicking 团队在2024年Science上发表"Native architecture of a human GBP defense complex for cell-autonomous immunity to infection”的文章。
原文链接:
https://doi.org/10.1126/science.abm9903
01
文章亮点总结
所有生物体都部署了细胞自主防御机制来对抗感染。在植物和动物中,大型超分子复合物通常激活免疫蛋白以提供保护。在这项工作中,我们解析了一个巨大的宿主防御复合物的天然结构,该复合物能够在人类细胞内的革兰氏阴性细菌表面聚合3万个鸟苷酸结合蛋白guanylate-binding proteins (GBPs)。这个巨大的纳米机器的构建需要几分钟时间,并能稳定维持数小时,此过程依赖于鸟苷三磷酸(GTP)的水解,并招募了四种GBP以及caspase-4和Gasdermin D作为细胞因子和细胞死亡免疫信号的平台。冷冻电子断层扫描表明,GBP1可以采取一种伸展构象插入细菌膜来建立此平台,从而触发脂多糖释放,激活共组装的caspase-4。我们的“开放构象”模型提供了一个动态视角,展示了人类GBP1防御复合物如何动员先天免疫对抗感染。
02
细胞膜损伤LDH释放检测
作者检测乳酸脱氢酶(LDH)的释放主要是为了评估细胞的焦亡(pyroptosis)状态。焦亡是一种程序性细胞死亡的形式,通常伴随着细胞膜的破裂和细胞内容物的释放,其中包括LDH。因此,LDH的释放水平可以作为细胞焦亡或细胞死亡程度的一个指标。GBP1(鸟苷酸结合蛋白1)在细胞自主免疫中起着关键作用,它能识别并响应病原体的存在。通过检测LDH的释放,可以评估GBP1激活后是否促进了细胞的焦亡,从而清除感染的病原体。LDH的释放也可以反映炎症小体(inflammasomes)的激活,这是一个复杂的蛋白质结构,当细胞感知到危险信号时会被激活,引发细胞焦亡并释放促炎细胞因子。通过比较不同条件下LDH的释放量,可以研究GBP1和其他相关蛋白(如caspase-4和gasdermin D)在细胞死亡过程中的作用和相互关系。而检测LDH的释放是评估细胞焦亡程度的一种常用方法,它有助于理解细胞自主免疫过程中GBP1防御复合体的作用机制,以及它如何影响细胞的命运和抗感染的能力。
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LDH释放检测方法对比
CytoTox 96 Non-Radioactive Cytotoxicity Assay Kit (G1780)是一种检测细胞膜受到破坏后释放出乳酸脱氢酶(LDH)的量从而检测细胞毒性的检测试剂盒。而这种特性可以应用于多种细胞介导的细胞毒性检测中,检测靶细胞受到效应细胞作用后带来的细胞膜破损从而释放的LDH。
G1780 拥有海量引文,
性能经过长时间和大量的客户验证
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