细胞膜损伤LDH释放检测应用文献：
Nature揭示GSDMD的激活是炎症性血脑屏障破坏的关键分子机制
LDH释放经常会被用于检测药物或者其他形式导致的细胞毒性，LDH释放可以作为判断细胞膜完整性的重要指标。
邵峰/罗敏敏团队合作在2024年Nature上发表“Brain endothelial GSDMD activation mediates inflammatory BBB breakdown”的文章。
原文链接：
https://doi.org/10.1038/s41586-024-07314-2
01
文章亮点总结
血脑屏障blood–brain barrier (BBB)保护中枢神经系统免受感染或有害物质的侵害(1)；其功能受损可能导致或加剧各种中枢神经系统疾病(2-4)。然而，感染和炎症条件下BBB破坏的机制仍然不甚清楚(5,6)。在这里，我们发现胞质脂多糖(LPS)传感器caspase-11激活成孔蛋白GSDMD（7-9），而不是由TLR4诱导的细胞因子，介导了在循环LPS的反应或在LPS诱导的脓毒症期间的BBB破坏。缺乏LBP-CD14 LPS转移和内化途径的小鼠可以抵抗BBB的破坏(10-12)。单细胞RNA测序分析显示，表达高水平GSDMD的脑内皮细胞（bECs）对循环LPS有显著反应。LPS作用于bECs，促进Casp11和Cd14的表达，并在体外和小鼠体内诱导GSDMD介导的质膜通透性和细胞焦亡。电子显微镜显示，这在破坏的BBB中具有超微结构变化，包括细胞焦亡的内皮细胞、紧密连接的异常外观以及血管从基底膜的脱离。
综合的小鼠遗传分析，结合针对bECs的腺相关病毒系统，证实了bECs中GSDMD的激活是LPS引起BBB破坏的基础。将活性GSDMD输送到bECs可以绕过LPS刺激并打开BBB。在CASP4人源化的小鼠中，革兰氏阴性的肺炎克雷伯菌感染破坏了BBB；这被bECs中表达的GSDMD中和纳米抗体所阻断。我们的发现概述了炎症性BBB破坏的机制，并为与BBB受损相关的中枢神经系统疾病的潜在治疗提供了线索。
02
细胞膜损伤LDH释放检测
作者使用CytoTox 96 Non-Radioactive Cytotoxicity Assay Kit试剂盒进行LDH释放的检测，当细胞膜完整性受损时，LDH会从细胞内释放到细胞外环境中，因此LDH释放可以作为检测细胞焦亡或其他细胞膜通透性死亡的标志物。
NINJ1（ninjurin 1）被认为是在细胞膜破裂和细胞死亡中起关键作用的蛋白。通过检测LDH的释放，可以评估NINJ1在诱导细胞膜破裂和细胞死亡过程中的功能。LDH的释放可以证明细胞膜的物理完整性已经被破坏，从而支持NINJ1的切割作用。
同时LDH释放的检测可以帮助区分不同类型的细胞死亡，比如凋亡（apoptosis）和焦亡（pyroptosis）。在焦亡中，细胞膜会迅速破裂，导致细胞内容物包括LDH的快速释放。在文章中，作者还利用LDH释放检测来评估不同药物处理或NINJ1突变体对细胞膜完整性和细胞死亡的影响。
03
LDH释放检测方法对比
CytoTox 96 Non-Radioactive Cytotoxicity Assay Kit（G1780）是一种检测细胞膜受到破坏后释放出乳酸脱氢酶（LDH）的量从而检测细胞毒性的检测试剂盒。而这种特性可以应用于多种细胞介导的细胞毒性检测中，检测靶细胞受到效应细胞作用后带来的细胞膜破损从而释放的LDH。
G1780 拥有海量引文，
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