在体外转录过程中，根据模板设计和试剂选择，mRNA可掺入标准核苷或化学修饰核苷。临床mRNA疗法普遍采用N1-甲基假尿苷(m1Ψ)、5-甲基胞苷(m5C)等修饰核苷酸，以降低药物物质的先天免疫原性，提升安全性与翻译效率。然而，这些修饰不仅改变了mRNA本身，也改变了作为副产物的dsRNA的结构特征。若继续使用针对未修饰dsRNA开发的检测体系来定量修饰后样本，将导致系统性定量误差，影响数据可靠性，为监管申报埋下隐患。

为此，Promega推出Lumit^® 修饰型dsRNA检测试剂盒——专为修饰mRNA药物研发场景设计的完整解决方案。该试剂盒提供与药物物质基质完全匹配的修饰标准品（含m1Ψ、m5C等常见修饰），以及经过优化的检测流程，确保准确识别并定量修饰后dsRNA杂质，为工艺优化和监管提交提供可信的数据支撑。

目前可提供的dsRNA检测包括：

技术应用：

• mRNA治疗和疫苗开发——用于确保mRNA产品的安全性和有效性，满足法规要求。

• 体外转录过程优化——用于优化IVT和纯化工作流程，以减少dsRNA污染。

• 质量控制和工艺开发——用于开发新的QC检测方法，进行常规检测。

• 高通量应用——支持进行大规模污染物筛查；可灵活使用独立组件，适用于自动化工作流程。

• 基础和转化研究——研究 dsRNA 在 mRNA 稳定性和免疫激活中的作用；开发具有降低免疫原性的新的 mRNA 递送系统。

技术优势：

• 卓越的特异性——不会与ssRNA或DNA发生交叉反应。   

• 定量检测——结果不依赖dsRNA的大小或序列（≥30 bp）。  

• 线性范围宽——为0.08–5ng/ml，性能优于商用ELISA试剂盒。

• 简化的工作流程——无需耗时的洗涤步骤或固定，75分钟即可获得结果。 

• 新方法——无需使用抗体进行检测。

Lumit^®检测技术是基于NanoBiT^® 萤光素酶互补的技术。NanoBiT^® 的两个亚基，SmBiT 和 LgBiT，被遗传融合到dsRNA结合蛋白上。在dsRNA存在的情况下，SmBiT 和 LgBiT 亚基会聚集形成一个活性NanoBiT^® 萤光素酶，产生一个与样品中dsRNA量成正比的发光信号。结果是浓度依赖性的发光信号，可以实现对dsRNA的定量和特异性检测。

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数据展示

01

Lumit^® dsRNA Assay检测限

Lumit^® dsRNA检测试剂盒展现出卓越的批内和批间精密度，以及极低的检测限。

使用Lumit^® dsRNA检测试剂盒在一系列dsRNA浓度下生成的标准响应曲线。每个点代表六次重复测量的均值，数据来自三次独立实验。所有测量值均使用GloMax^® Discover板式发光检测仪记录。经计算，该检测方法的检测限（LoD）为0.37 pg/ml，定量限（LoQ）为1.12 pg/ml，充分体现了其卓越的灵敏度和可重复性。

02

使用Lumit^® dsRNA Assay检测修饰型与非修饰型dsRNA

修饰型dsRNA标准品的标准曲线响应范围。针对每种修饰型dsRNA标准品制备标准曲线：假尿苷(Ψ)、N1-甲基假尿苷(m1Ψ)、5-甲氧基尿苷(mo5U)和5-甲基胞苷(m5C)。发光值在扣除背景后绘制，使用GloMax^® Discover 系统，积分时间为0.5 秒。此图仅用于说明和示例目的。每块实验板均需进行标准曲线测定。绝对 RLU 值会因发光检测仪的灵敏度和设置而有所不同。

订购信息

修饰型dsRNA标准品的标准曲线响应范围。针对每种修饰型dsRNA标准品制备标准曲线：假尿苷(Ψ)、N1-甲基假尿苷(m1Ψ)、5-甲氧基尿苷(mo5U)和5-甲基胞苷(m5C)。发光值在扣除背景后绘制，使用GloMax^® Discover 系统，积分时间为0.5 秒。此图仅用于说明和示例目的。每块实验板均需进行标准曲线测定。绝对 RLU 值会因发光检测仪的灵敏度和设置而有所不同。

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产品	规格	目录号
Lumit® dsRNA Detection Assay (unmodified)	100 assays  500 assays	W2041 W2042
Lumit® dsRNA Standard (unmodified)	15µl	W2040
Lumit®5-methoxyuridine dsRNA Detection Assay	100 assays  500 assays	W2071 W2072
Lumit® dsRNA Standard (5-methoxyuridine)	15µl	W2070
Lumit®5-methylcytidine dsRNA Detection Assay	100 assays  500 assays	W2081 W2082
Lumit® dsRNA Standard (5-methylcytidine)	15µl	W2080
Lumit®N1-methylpseudouridine dsRNA Detection Assay	100 assays  500 assays	W2051 W2052
Lumit® dsRNA Standard (N1-methylpseudouridine)	15µl	W2050
Lumit®Pseudouridine dsRNA Detection Assay	100 assays 500 assays	W2061 W2062
Lumit® dsRNA Standard (Pseudouridine)	15µl	W2060
Lumit® dsRNA Assay Buffer	8 ml	W2010

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