糖尿病研究

我们为糖尿病研究人员提供了一种简单、可靠的方法来检测激素分泌和细胞代谢。


产品包括用于检测胰岛素和胰高血糖素分泌、葡萄糖摄取、糖异生和脂肪生成以及其他代谢活动的基于平板的检测试剂盒。Promega提供的发光检测方法比其他方法更灵敏,并且操作简单,节省了时间可以帮助您更快地进行下一次实验。


替代ELISA,检测胰岛素和胰高血糖素的方法


传统的ELISA或RIA检测方法需要许多操作步骤,因此检测胰腺细胞或胰岛分泌的胰岛素和胰高血糖素被认为是一项繁重的工作。均质的免疫检测方法减少了所需操作的步骤,并且可扩展到检测大量数据点,例如来自灌注实验的数百或数千个样本。


使用Lumit™技术,您可以在70分钟内从基于细胞的分泌物中得到高质量的数据。该方法操作简单,没有清洗或转移步骤,可以扩展并适应多种孔板及相应通量的需求。使用Lumit™检测方法,您可以在早上进行高通量的葡萄糖刺激胰岛素分泌(GSIS)实验,并在下午分析胰岛素和胰高血糖素分泌的数据,使您快速做出实验决策,推进糖尿病研究。

Lumit™免疫检测原理:根据其特异性和灵敏度选择一抗用于检测感兴趣的分析物。抗体分别用NanoLuc®萤光素酶的大小亚基(称为SmBiT和LgBiT)进行化学标记。在分析物存在的情况下,两种抗体非常接近,从而使SmBiT和LgBiT聚集在一起,形成有活性的酶。在添加优化后的萤光素酶底物后产生明亮的发光信号。



Lumit™ Assay引文


在这项工作中,El和同事们使用Lumit™ Glucagon Immunoassay来描述控制α细胞胰高血糖素分泌的复杂调节机制。

El, K. et al., (2021) GIP mediates the incretin effect and glucose tolerance by dual actions on alpha cells and beta cells. Sci. Adv. 7, eabf1948.


方法验证和3D胰岛微组织用于糖尿病研究


在本次与Insphero联合举办的网络研讨会上,我们解决了糖尿病研究中的一些挑战,这些挑战可以通过3D胰岛细胞培养模型和针对3D应用优化的分析来克服。



简单、可靠的细胞胰岛素活性测定方法


胰岛素水平响应的常见途径


● 脂肪生成Lipogenesis:

在胰岛素作用下,脂肪细胞和肝细胞中甘油三酯和其他脂质分子的生成上调。通过这种方式,胰岛素促进了脂质分子的生成和存储。胰岛素水平的升高向细胞表明能量(葡萄糖)充足,应该储存起来。脂肪生成导致甘油三酯水平的增加可以使用Triglyceride-Glo™ Assay来检测


● 脂肪分解Lipolysis:

脂肪分解是将甘油三酯分解成甘油和三个脂肪酸的分子。胰岛素抑制脂肪分解,因此当胰岛素水平升高时,细胞优先使用葡萄糖。脂肪分解的结果是甘油分子的增加,这可以通过Glycerol-Glo™ Assay来检测。


● 糖异生Gluconeogenesis:

在胰岛素水平升高的细胞中,新的葡萄糖分子的生成受到抑制。因为胰岛素在葡萄糖升高时也升高,胰岛素向细胞发出信号,从而使其不再产生葡萄糖,而是利用现有的葡萄糖。葡萄糖水平可以通过Glucose-Glo™ Assay来检测。


● 葡萄糖摄取速率Glucose Uptake Rate:

胰岛素通过葡萄糖转运蛋白增加细胞摄取葡萄糖的速率,使细胞可以摄取葡萄糖用以储存和使用。Glucose Uptake-Glo™ Assay可用于检测葡萄糖摄取率的增加。


● GLUT4转运GLUT4 Translocation:

在胰岛素存在下,GLUT4转运蛋白被转运到细胞膜上,促进细胞摄取葡萄糖。GLUT4主要存在于脂肪细胞和肌肉细胞。GLUT4-HiBiT Reporter*可用于实时监测细胞内GLUT4转运蛋白的移位。


● 糖原生成Glycogenesis:

糖原是葡萄糖的聚合物,是一种主要的碳水化合物储存形式。胰岛素上调肌细胞和肝细胞中糖原形式的葡萄糖储存。Glycogen-Glo™ Assay*可用于检测糖原的增加。


* Glycogen-Glo™ Assay和GLUT4-HiBiT Reporter可以通过定制途径购买,购买请咨询Promega。






能量代谢检测方法


Promega提供一系列基于平板的即用型能量代谢检测方法,包括葡萄糖、乳酸、谷氨酸、氧化应激和二核苷酸检测方法。采用生物发光技术,灵敏度更高,是研究细胞代谢的强大研究工具。