HiBiT蛋白标签技术

HiBiT Protein Tagging

高灵敏的分析和定量蛋白质,根据您的需求量身定制!HiBiT技术允许使用简单、单一试剂的生物发光方法和高亲和力抗体,精确定量和定位蛋白质。这种适应性和灵敏度为研究蛋白质的功能、降解、分泌和相互作用提供了新的可能性,尤其是在内源性水平上。

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监测受体内化

HiBiT检测方法消除了受体内化研究中基于抗体检测的必要。使用HiBiT技术,操作流程中去除了多个抗体结合步骤和相关的洗涤步骤。只需加入检测试剂,即可测量出发光信号。


定量蛋白丰度和降解

经典的表位标记方法在通量或灵敏度上是有限的,要求使用高质量的抗体,但也可能只产生半定量的结果。HiBiT标签将生物发光的简便性和灵敏度引入到蛋白质丰度的研究中,可对内源性水平的蛋白质进行定量,即使是那些维持在低表达水平的蛋白质。


快速简单的免疫印迹检测


1. 什么是HiBiT印迹检测?


  • HiBiT印迹检测:一种快速、灵敏的Western Blot替代方法;
  • 5分钟内出结果;
  • 无需抗体;
  • 背景低,灵敏度高;
  • 无需洗涤或封闭步骤。


HiBiT是一种基于蛋白质互补的生物发光检测方法。HiBiT标签被添加到你感兴趣的蛋白质中,当互补的LgBiT亚基与HiBiT结合时,形成一个具有功能性的萤光素酶进行检测。







2. HiBiT与传统的表位标签不同


  • 在传统的Western blotting中,你需要一个目标蛋白或表位标签的抗体,以及一个检测该种抗体的方法。
  • 使用HiBiT,无需抗体,消除了实验处理步骤,并最大限度地缩短了手动操作的时间。


3. HiBiT蛋白标签的优势


  • 易于定量及检测
  • 无需封闭
  • 与基于抗体的方法不同,没有背景,使用HiBiT印迹,检测试剂是否非特异性地结合到膜上并不重要,只有当它与带有HiBiT标记的蛋白质结合时,才会有发光信号。


4. 如何应用HiBiT标签


  • 监测细胞内的蛋白丰度
  • 蛋白降解研究
  • 监测受体内化
  • 插入并检测CRISPR敲入效率


参考文献:
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5) Sasak, M. et al. (2018) Development of a rapid and quantitative method for the analysis of viral entry and release using a NanoLuc luciferase complementation assay. Virus Res. 243, 69-74.  
6) Tamura, T. et al. (2019) In Vivo Dynamics of Reporter Flaviviridae Viruses. J Virol. 93(22), e01191-19.

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