Lumit®检测方法
Lumit® Assay Formats
1. 直接检测
标记有SmBiT和LgBiT的一抗直接与目标分析物结合(例如:Lumit®细胞因子检测)。可通过简单的、免清洗操作步骤定量测定细胞培养样品中的靶标分析物。可以在细胞培养样品中或从细胞板转移出的培养基中直接进行测定。
2. 间接检测
SmBiT和LgBiT标记二抗。允许灵活进行测定开发(例如:Lumit®免疫检测细胞系统)
在Lumit®免疫检测细胞系统中,将LgBiT和SmBiT亚基与来自两个不同物种的一对二抗偶联。在多孔板中,用与NanoBiT®兼容的裂解缓冲液(洋地黄皂苷)裂解接种的细胞,并通过添加包含两种针对靶蛋白的一抗的抗体混合物以及与SmBiT-和LgBiT-偶联的二抗来检测靶标蛋白质。
3. 竞争性结合检测
需要抗体和示踪剂标记。适用于小分子检测和其他专业应用。(例如:Lumit® FcRn 免疫结合检测)
Lumit® FcRn免疫检测用于测定人FcRn与Fc蛋白(包括抗体)之间的相互作用。将标记有LgBiT的人IgG1(Tracer-LgBiT)作为示踪剂,与链霉亲和素-SmBiT结合的C端生物素化的人FcRn(hFcRn-Biotin-SA-SmBiT)作为靶标。在没有抗体分析物样品存在的情况下,Tracer-LgBiT与hFcRn-SmBiT靶标结合,产生最大的发光信号。未标记的IgG会和Tracer-LgBiT竞争与FcRn靶标的结合,从而导致发光信号随分析物浓度升高而下降。

Lumit®免疫检测产品
Promega可提供的Lumit®免疫检测产品如下:
其中,Lumit® Immunoassay Labeling Kit用于标记抗体对,标记好的抗体对可用于建立Lumit® 免疫检测系统。Lumit® 检测试剂和预先标记的LgBiT和SmBiT二级抗体结合物也可单独购买。
除了以上所列的产品外,我们还提供Lumit®的定制开发咨询。请点击此处与我们联系,讨论如何开发自定义解决方案。