⦁  三重态：指荧光团的一种特定能量状态。它比基态具有更高的能量，但与单重态相比，具有不同的自旋状态。自旋状态的不同使得返回基态（及发光）的可能性降低或速度变慢，这可能导致光漂白。

⦁  衍射极限：传统光学显微镜分辨能力的极限，由光的波长和显微镜镜头的数值孔径决定。换句话说，这是镜头可以聚焦光线的最小斑点尺寸。

⦁  量子产率：发射的光子数与吸收的光子数之比。量子产率描述了荧光团将激发波长转换为荧光的效率，并且独立于仪器设置。在显微成像中，量子产率影响荧光团的亮度和光稳定性，以及整体图像质量。

STED 显微成像的基本原理涉及两个激光束：一个激发激光和一个损耗激光。激发激光首先将样本中的荧光团激发到较高能态。然后使用通常呈环形的损耗激光，将除中心区域外的所有已激发荧光团刺激回基态；在这个非常小的中心区域内，损耗激光的强度为零，因此其中的荧光团仍然保持激发态。

这种选择性损耗有效地缩小了荧光发射区，从而将发射限制在一个亚衍射体积内。通过扫描整个样本上的焦点区域，可以构建出高分辨率图像。

如果想避免自发荧光和光漂白，可以通过在细胞和整个动物中使用生物发光成像来实现。

STORM 显微成像的核心原理依赖于单个荧光团的精确定位。通过在高度标记的样本中时间上分离单个荧光团的激活和成像，STORM通过激活、成像和定位的迭代循环构建高分辨率图像。以下是STORM的主要组成部分和机制的描述：

⦁  激活与成像：荧光团以随机的方式在稀疏的子集中被激活，确保在任何给定时间内只有少数发出荧光。这防止了发射点的重叠，从而允许进行精确的定位。

⦁  单分子定位：每个激活的荧光团的位置通过将其发射光点的扩展函数（PSF）拟合到高斯轮廓来确定，以实现高精度。然后记录下各个荧光团的坐标。

⦁  图像重构：经过多次激活和成像循环后，从数千到数百万个单个荧光团的累积位置重建出超分辨率图像。