什么是荧光显微成像?
What is Fluorescence Microscopy?


上图。通过 HaloTag® 配体和 Anti-HaloTag® 多克隆抗体对单个 HaloTag® 7 融合蛋白进行特异性标记。
荧光显微成像工作原理
How Does Fluorescence Microscopy Work?

荧光显微成像技术应用
What is Fluorescence Microscopy Used For?
荧光显微成像在各个科学领域中有广泛的应用。以下是一些应用实例:
⦁ 分子生物学 通过标记 mRNA 或特定蛋白质并跟踪其在活细胞中的合成、运输和降解,可以研究基因表达。这使得能够可视化蛋白质-蛋白质相互作用、膜蛋白定位以及细胞对外界变化或刺激(如生长因子或应激)的信号通路响应。 |
![]() 活细胞表面 HaloTag® 融合蛋白的标记。 |
⦁ 细胞生物学 荧光显微成像能够可视化细胞结构,如细胞器、细胞膜和细胞骨架成分。还可以在细胞中追踪蛋白质的定位,从而深入了解它们的细胞功能。此外,可以观察特定的蛋白质动态,比如它们形状的变化、随时间与其他细胞成分的相互作用以及一般运动。 |
![]() 使用 Janelia Fluor® HaloTag® 配体进行细胞不可渗透配体成像。 |
⦁ 神经科学 绘制神经回路图,包括神经元连接以揭示信号传输。还可以通过追踪个别突触来观察特定的突触活动。也可以观察神经递质的动态,如释放、扩散和再摄取。 |
![]() 使用 Anti-βIII 微管蛋白单克隆抗体对大鼠小脑进行 βIII 微管蛋白免疫染色。 |
荧光显微成像的优劣势
Fluorescence Microscopy Advantages and Disadvantages
优势 | 劣势 |
⦁ 靶向标记 ⦁ 多重检测 可以同时使用多个荧光标签,从而在同一样本中可视化多个目标。 ⦁ 高对比度 荧光显微成像提供高对比度的图像,因为背景通常是暗的,只有荧光标记的结构可见。这增强了特定特征的可见性。 ⦁ 广泛的应用范围 荧光显微成像具有多功能性,可应用于广泛的样本,包括固定和活细胞、组织和整个生物体。 ⦁ 适应性 各种荧光探针和技术(如 FRET、FRAP、STORM)可以适应研究不同的生物过程和相互作用。 | ⦁ 自发荧光 |
荧光活细胞成像
Fluorescent Live Cell Imaging
用于活细胞成像的荧光配体 Promega提供多种荧光 HaloTag® 配体,能够实现活细胞成像。同时提供使用荧光 HaloTag® 配体进行快速和免洗活细胞成像的完整操作方案。查看操作方案以了解如何优化得到既强大又特异的信号。 | ![]() |
荧光活体成像
In Vivo Fluorescence Imaging
荧光活体成像(FLI)利用荧光探针或配体,在外部光源激发下发光。
⦁ 多重检测 用于识别蛋白质和基因靶标的荧光探针广泛可用,允许多种多重检测的可能性。 ⦁ 快速分析 由于荧光配体产生的光子数量多,图像可以在短时间内捕获,从而实现荧光标记的快速分析。 ⦁ 自发荧光 组织的自然荧光可能干扰荧光探针的信号,降低对比度和准确性。 ⦁ 光漂白 长时间暴露于光线下会导致荧光分子失去发光能力,随着时间的推移影响成像质量。因此,长期的动力学研究可能不可行。 ⦁ 毒性 某些荧光染料或探针可能对活组织有毒,影响样本的存活率和结果的准确性。
荧光活体成像优势
荧光活体成像劣势



