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来源: 发布时间:2021/3/26 9:48:00


免疫学检测不只是ELISA,还有更快更准更灵活的“它”等你来体验!




常规的免疫检测方法,例如Western blot、夹心法ELISA或其他用于药物靶标研究的酶免疫检测法,既费时而且产生的结果可变性又高。此时,一种免洗且能在溶液中进行的免疫检测系统就具有明显的优势。该类型检测系统按照简单的“添加-混合-读数”方案进行,减少了手动操作时间。

浏览至文末获取更多Lumit™技术资源



READY GO

 


1. Lumit™ 技术概要





NanoLuc® Binary Technology(NanoBiT®),是基于NanoLuc®萤光素酶(19kDa)的由两部分组成的结构互补性系统,是一种被证实可在细胞水平上分析蛋白质的技术。

NanoBiT®是由11个氨基酸的亚基(低亲和力的SmBiT或高亲和力的HiBiT)与其同源的大亚基(LgBiT)结合而形成一种明亮的萤光素酶,该酶在加入底物furimazine时产生光信号。

我们构建的NanoBiT®亲和免疫检测系统,其中互补抗体(或其他亲和试剂)用NanoBiT®亚基标记,因而当抗体与分析物结合时,会使SmBiT和LgBiT相互靠近,从而产生与分析物水平成正比的信号。

这种免疫检测方法具有以下优点:

● 简单的“加样-读数”模式,无需转移样品,无需洗涤,可直接在细胞中进行实验

● 快速,30-90分钟即可完成全部操作

● 可兼容高通量检测

● 宽广的动态检测范围,减少了样品稀释的需要

● 使用标准的可读板的发光检测仪

● 平台包括即用型试剂盒和检测试剂;用户也可以建立自己的免疫检测方法

● 可开发定制抗体标记和免疫检测分析

  • 细胞信号通路分析(检测总蛋白水平和磷酸化蛋白水平),建立自己的Lumit™免疫检测的标记试剂盒目前均已发布;


  • 细胞因子(如IL-1β)、代谢靶标(如胰岛素)、FcRn结合的检测方法 coming soon,敬请期待!





2. Lumit™ 检测方法





基于NanoBiT®技术的生物发光

免疫检测平台


1.间接法:Lumit™免疫检测细胞系统已发布

快速的均质型检测,简单的“加样-读数”模式


以NF-kB信号通路研究为例:

● TNF处理MCF-7细胞后,激活NF-kB信号通路,检测总的和磷酸化的IkBα

Lumit™ IkB检测揭示了TNF处理后NF-κB信号通路的预期生物学特性:IκBα磷酸化(pS32)后立即发生快速降解。


● TNF处理细胞后,当 MG132存在时,检测总的和磷酸化的IkBα

检测蛋白酶体抑制剂处理后NF-κB信号通路的预期应答:IkBα降解减少,磷酸化的IkBα发生积累。


2.直接法:Lumit™细胞因子免疫检测coming soon

以检测细胞中释放的IL-1β为例: 

正在开发的细胞因子检测系统包括,但不限于:IL-2, IL-4, IL-6, IL-10, IFN-γ,TNF-α以及VEGF。


3.竞争性结合法:Lumit™ FcRn免疫检测(coming soon

优势特性:

● Lumit™ FcRn 免疫检测完全基于溶液,因而最大限度地减少了由固定而产生的实验假象的可能性

● 均质型检测(加样-读数),无需清洗

● 基于生物发光的检测提供了宽广的线性范围以及较大的检测窗口

● 检测迅速(30min),所需样本体积小(10-20µl)

● 使用96/384孔白板可实现灵活的通量和自动化功能

检测抗体性能:

Panitumumab-FcRn结合的剂量应答曲线相对于标称(100%)浓度作图,抗体浓度分别对应于标称浓度的180%,150%,100%,75%,50%,25%,12.5%,6.25%。





3. Lumit技术资源




产品列表:

更多资源:


Lumit™免疫检测资源汇


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Lumit™免疫检测技术文章


Lumit™免疫检测产品说明书




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