基于体外表达的蛋白功能分析
无细胞蛋白质合成（Cell-free protein synthesis，CFPS），也称为体外转录/翻译系统，是一种重要且通用的工具，可用于分子生物学家在基础和应用科学中阐明细胞途径和机制。无细胞蛋白质合成系统已成为高通量功能基因组学和蛋白组学中广泛应用且十分有效方法。
无细胞蛋白合成的应用包括：功能基因组 / 蛋白质组分析；难表达蛋白的表达；蛋白质进化 / 酶工程；转录 / 翻译调控分析；筛选以及蛋白质标记等。
相比于活细胞中的蛋白质表达，无细胞蛋白质合成系统能够提供更为显著的优势。
无细胞蛋白表达系统的优势：
1. 提高功能性和可溶性全长蛋白的总产率，节省大量时间；
2. 为表型（被表达的蛋白的功能）和基因型建立联系提供了最快的方式；
3. 蛋白质合成灵活多样，可以使用多种方式进行；
4. 是一种开放性反应系统，可主动监测，迅速取样和筛选，不需要基因克隆步骤；
5. 由于没有细胞障碍限制翻译控制，可作为一种较为理想的方法，用于合成传统方式难以表达和进行后续分析的蛋白质；
6. 可缓解对于生产蛋白的潜在毒性的担忧。
01
蛋白表达系统选择
Promega的无细胞蛋白表达系统分为：
1. 真核无细胞蛋白表达系统
• 兔网织红细胞蛋白表达系统
• 麦胚蛋白表达系统
• 昆虫细胞提取物蛋白表达系统
2. 原核无细胞蛋白表达系统
• 大肠杆菌提取物蛋白表达系统
02
蛋白纯化和检测
Promega提供多种蛋白纯化系统，可根据实验需求进行选择。
03
蛋白相互作用
机体细胞内每个蛋白质并不是独立发挥作用，通常与其它蛋白质或DNA相互作用，在特定的时间和空间内行使特定的功能，构成各项生命活动的基础。
1. 蛋白：蛋白相互作用
• 哺乳动物双杂交系统：
双杂交系统是用于体内蛋白与蛋白相互作用检测的极为有力的工具。
• Pull-Down系统：
HaloTag® 哺乳动物 Pull-Down 系统用于捕获和纯化细胞内成对的和高等级的蛋白复合物，包括瞬时的或弱相互作用的伴侣蛋白。
2. 蛋白：DNA相互作用
• HaloCHIP™ 系统：
HaloCHIP™ 系统是一种为共价捕获细胞内蛋白 : DNA 复合物而设计的一种新方法，不需要抗体，是普通的染色质免疫共沉淀 ( ChIP ) 之外的又一种高效的，有力的替代方案。
04
其他工具资源
1. 点击查看无细胞蛋白表达载体图谱，载体序列以及使用说明书。
2. 点击查看无细胞表达的新型应用方向
3. 点击查看转录/翻译偶联系统的应用示例
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