基于体内表达的蛋白功能分析

多种蛋白标签,玩转你的活细胞蛋白表达

引言

Promega提供基于细胞的蛋白表达系统,以及多种功能蛋白标签,帮您从蛋白表达,蛋白标记,蛋白检测定量等方面进行蛋白功能的研究。


蛋白标签

蛋白或多肽是细胞功能的组成部分。它们是构成能量代谢、细胞生长、信号传递、细胞分裂周期和细胞死亡途径的酶。分离和检测特异性蛋白使我们了解哪些蛋白属于较大复合物的一部分,哪些蛋白会发生相互作用以及蛋白在细胞功能和疾病治疗中的作用。检测蛋白功能的方法之一就是在靶蛋白上添加一个标签,并将蛋白从细胞裂解物中分离出来进行研究。

1.HiBiT蛋白标签
一种具有11个氨基酸的极小的肽标签(称为HiBiT),非常适合标记蛋白。如果希望跳过传统的克隆方法,你甚至可以使用CRISPR基因编辑将HiBiT标签添加至内源性蛋白中。更多详情可查看下方视频讲座介绍。 




2.HaloTag® 蛋白标签
HaloTag® 蛋白标签与其他哺乳动物蛋白没有同源性,且背景更低。不仅可用于蛋白间的相互作用和蛋白纯化,同时也有助于破译蛋白与DNA的相互作用。更多详情可查看下方视频讲座介绍。 



蛋白标记和检测

HaloTag® 蛋白标签是大肠杆菌和哺乳动物细胞均兼容的标签选择。通过与其配体之间的共价结合,背景更低。通过在哺乳动物细胞中表达HaloTag-融合蛋白,进行翻译后修饰,更能反映蛋白在细胞条件下的运作方式。具有多种融合蛋白载体,满足您多方面的实验需求。

HaloTag® Mammalian Pull-Down and Labeling System 

G6500


HaloTag® Mammalian Protein Detection and Purification System

G6795



蛋白定量

HiBiT标签蛋白分子量小,只有11个氨基酸,对所研究蛋白影响小,且商品化HiBiT载体,可以快速将HiBiT标签与感兴趣蛋白构建融合蛋白载体,定量和检测细胞内或分泌型蛋白的表达。


HiBiT检测系统

Nano-Glo®HiBiT Blotting System                                

N2410


Nano-Glo®HiBiT Extracellular Detection System

N2420


Nano-Glo®HiBiT Lytic Detection System              

N3030



白相互作用

蛋白质2113与蛋白质之间的相互作用构成了细胞生化反应网络的一个主要组成部分,其与转录调控网络对调控细胞及其信号传导有着重要意义。Promega的两大优势技术为您的的活细胞蛋白互作研究提供向导。

1. NanoBiT® 技术

是一种基于Promega 最新专利萤光素酶NanoLuc® Luciferase 的二亚单元系统,用来检测活细胞内蛋白质的相互作用。更多详情可查看下方视频讲座介绍。




2. NanoBRETTM 技术
NanoBRETTM分析是大幅度改良的BRET 分析平台,使用NanoLuc® luciferase 作为能量供体和HaloTag® 蛋白标记的NanoBRETTM 618 荧光基团作为受体。更多详情可查看下方视频讲座介绍。




3. 活细胞蛋白相互作用检测产品

NanoBRET™ Nano-Glo® Detection System

N1661

Nano-Glo® Live Cell Assay System                   

N2011


查看活细胞蛋白相互作用全部产品 


蛋白降解

Promega基于多项优势技术,为您提供检测蛋白降解靶向嵌合体(Proteolysis targeting chimeras,简称PROTACs)的完整解决方案:从透膜性,三聚体形成,泛素化,蛋白酶体结合到最终蛋白质降解。




NanoBRET™ VHL and CRBN Ternary Complex Starter Kit

ND2700



     
查看NanoLuc萤光素酶技术
更多资源

1. 如何为你的目的蛋白选择合适的标签? 


2. HiBiT蛋白标签系统应用资源


3. HaloTag蛋白标记与分析资源


4应用文献

HiBiT技术:
[1] Sasaki, M., Anindita, P.D., Phongphaew, W., Carr, M., Kobayashi, S., Orba, Y.and Sawa, H. Virus Res.243, 69–74. Development of a rapid and quantitativemethod for the analysis of viral entry and release using the NanoLuc® luciferase complementation assay.2017

[2Rouault, A.A.J., Lee, A.A. and Sebag, J.A. Biochim.Biophys. Acta.1864, 2322–9.Regions of MRAP2 required for the inhibition of orexinand prokineticin receptor signaling.2017

NanoBiT®技术:
[1] Chaudhri, A.,etal. PD-L1Binds to B7-1 Only In Cis onthe Same Cell Surface. Cancer Immunol. Res. 2018.

NanoBRETTM技术
[1] Miyakawa, Nishi, Matsunaga, et al. The tumour suppressor APC promotes HIV-1 assemblyvia interaction with Gag precursor protein. NatureComm, 2017