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NanoLuc®萤光素酶
NanoLuc® Luciferase
NanoLuc®萤光素酶的小尺寸和明亮的发光特性为许多应用带来了极高的检测灵敏度。从NanoBRET®技术，一种基于BRET的方法来研究蛋白质：蛋白质和蛋白质：小分子相互作用，到NanoLuc®二亚单元技术(NanoBiT)，NanoLuc®是在生理相关水平上研究细胞中遗传反应和蛋白质动态的基石。
NanoBRET®技术
NanoBRET® Technology
| NanoBRET® 技术是一种基于生物发光共振能量转移（BRET）的方法，用于活细胞中蛋白质：蛋白质相互作用检测或化合物：靶点相互作用结合检测。NanoLuc® 萤光素酶因其明亮的信号和较窄的蓝移发射光谱而成为理想的BRET能量供体。在NanoBRET® 蛋白质：蛋白质相互作用检测中，其中一个蛋白质与NanoLuc® 萤光素酶融合表达，另一个蛋白质与HaloTag® 融合表达，并用细胞可渗透性的NanoBRET® 618荧光基团进行标记。来自 NanoLuc® 供体的明亮的蓝移发光信号耦合到远红移的 HaloTag® 受体上后，光谱叠加更佳、信号更强、且与传统 BRET 分析相比背景更低。
 针对许多热门靶点，Promega提供预构建载体、DIY系统以及NanoBRET® PPI开发定制服务供客户选择。 | |
NanoBRET® Target Engagement (TE) 技术
| NanoBRET® 技术还可应用于活细胞中化合物与靶标的结合检测，称为NanoBRET® Target Engagement（TE）。在这种检测形式中，靶蛋白在细胞中作为NanoLuc® 萤光素酶融合体表达。加入一种可穿透细胞的NanoBRET® 荧光示踪剂，它会可逆地结合到靶蛋白上。荧光示踪剂与NanoLuc® 融合蛋白结合会导致能量转移并产生BRET信号。与靶蛋白结合的待测化合物会与示踪剂竞争，从而导致NanoBRET® 信号的丧失，从而可以定量检测细胞内化合物的亲和力。NanoBRET® TE还可用于计算分数占据率、化合物选择性、细胞内化合物可用性和化合物滞留时间。NanoBRET® TE Assay使用重组NanoBiT® 萤光素酶作为能量供体，从而能够研究细胞内蛋白复合物上的靶点结合。针对包括340多种激酶在内的许多关键药物靶点，均有预设计Assay可供选择。此外，还提供DIY工具以及定制开发和细胞激酶选择性分析服务。 | NanoBRET® TE assay原理 |
